本試劑盒采用競爭ELISA法檢測人樣本中吖啶橙(AO)含量。試劑盒微孔板預(yù)先包被AO特異性抗原，待測樣本中的AO與固相包被抗原競爭結(jié)合有限的AO特異性抗體，孵育反應(yīng)后洗去未結(jié)合組分，再加入HRP標記的二抗結(jié)合已結(jié)合的一抗。加入TMB底物進行酶促顯色反應(yīng)，底物顯色深淺與樣本中AO濃度呈負相關(guān)，即樣本中AO含量越高，競爭結(jié)合的抗體越多，固相結(jié)合的抗體越少，顯色越淺。通過酶標儀測定吸光度，結(jié)合標準曲線即可定量分析樣本中AO的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：≤0.02μg/mL

檢測范圍：0.05μg/mL–5μg/mL

反應(yīng)時間：封閉 30min，樣本孵育 70min，顯色 12min

顯色系統(tǒng)：OPD 顯色液，硫酸終止

檢測波長：492nm

特異性：專一結(jié)合游離態(tài)吖啶橙，核酸結(jié)合態(tài) AO 檢出偏差＞20%

重復性：板內(nèi) CV＜7%，板間 CV＜9%

注意事項：該試劑具有弱毒性，操作佩戴手套，廢液需集中無害化處理
儲存與有效期：

未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個月。

開封后保存

剩余酶標板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個月內(nèi)用完。

HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。

復溶后標準品：分裝 - 20℃凍存，避免反復凍融，1 個月內(nèi)使用。

過期試劑禁止使用。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

試劑盒室溫靜置 30min 恢復環(huán)境溫度，取出可拆卸酶標板，規(guī)劃實驗孔排布，標注組別。

梯度配制 AO 標準品液，標準孔加標準品 50μL；樣本孔加入離心澄清后的待測樣本 50μL；空白孔無添加。

全部檢測孔加入一步法酶標記結(jié)合液 50μL，橫向晃動酶標板混勻，封板膜嚴實密封微孔。

37℃恒溫培養(yǎng)箱避光孵育 70min，杜絕溫度大幅波動。

徹底傾倒孔中液體，洗板液灌滿每孔，浸泡 40s 后在吸水紙上拍凈殘液，連續(xù)洗板 6 次。

每孔依次添加顯色液 A、B 各 50μL，遮光混勻，37℃避光顯色 18min。

加入終止液 50μL 終止底物反應(yīng)，震蕩混勻，5min 內(nèi)在 450nm 波長檢測 OD 值，計算樣本 AO 濃度。