本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA原理檢測(cè)人樣本中癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)含量。微孔板表面包被OIT3特異性捕獲抗體，加入待測(cè)樣本后，樣本中的OIT3抗原與固相抗體特異性免疫結(jié)合，經(jīng)洗滌去除未結(jié)合組分。加入HRP標(biāo)記的OIT3檢測(cè)抗體，形成完整的夾心免疫復(fù)合物，洗滌后加入TMB顯色底物，在酶的催化下發(fā)生顯色反應(yīng)，終止反應(yīng)后通過酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度。吸光度數(shù)值與樣本中OIT3的濃度呈正相關(guān)，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可精準(zhǔn)定量檢測(cè)OIT3表達(dá)水平。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E223 |
英文名稱 | OIT3 Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：≤6pg/mL
檢測(cè)范圍：20pg/mL–1200pg/mL
反應(yīng)時(shí)間：樣本孵育 75min，二抗 35min，顯色 16min
顯色系統(tǒng)：HRP 催化 TMB 顯色
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm
特異性：不結(jié)合同家族其他轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白
重復(fù)性：板內(nèi) CV≤5.8%，板間 CV≤7.8%
注意事項(xiàng)：細(xì)胞裂解液樣本需離心去除沉淀雜質(zhì)后上樣
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測(cè)，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會(huì)漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫靜置 30min 回溫，取出酶標(biāo)板固定于板架，按需劃分實(shí)驗(yàn)孔位并編號(hào)。
標(biāo)準(zhǔn)品孔加入梯度稀釋 OIT3 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL；待測(cè)孔加入組織裂解稀釋樣本 50μL；空白孔無加樣。
向全部檢測(cè)孔添加一步法酶偶聯(lián)抗體工作液 50μL，震蕩混勻微孔體系，封板膜密封。
37℃恒溫孵育 68min，孵育期間不可挪動(dòng)酶標(biāo)板。
棄去孔內(nèi)液體，洗滌液加滿每孔浸泡 35s，徹底拍干，循環(huán)洗板 5 次。
每孔加入顯色 A 液、B 液各 50μL，避光混勻，37℃避光顯色 17min。
滴加終止液 50μL 混勻終止反應(yīng)，5~10min 內(nèi) 450nm 測(cè)定 OD 值，換算樣本 OIT3 濃度。
關(guān)鍵字： 人癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3;OIT3;ELISA試劑盒;
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