本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA技術(shù)定量檢測(cè)人樣本中癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl。微孔板固相載體包被p190/bcr-abl特異性捕獲抗體，待測(cè)樣本中的靶蛋白可與固相抗體特異性結(jié)合，洗板去除游離雜質(zhì)后，加入HRP標(biāo)記的對(duì)應(yīng)檢測(cè)抗體，形成固相抗體-靶蛋白-酶標(biāo)抗體夾心復(fù)合物。后續(xù)加入TMB底物進(jìn)行酶促顯色，終止反應(yīng)后檢測(cè)450nm處吸光度，顯色強(qiáng)度與樣本中p190/bcr-abl蛋白濃度呈正相關(guān)，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合計(jì)算即可得到樣本中靶蛋白的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E296 |
英文名稱 | Oncogene Protein p190/bcr-abl Oncogene Protein p190/bcr-abl Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：≤0.1ng/mL
檢測(cè)范圍：0.3ng/mL–20ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：一抗孵育 100min，酶標(biāo)抗體 55min，避光顯色 22min
顯色系統(tǒng)：雙組分 TMB 顯色液
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm，參比 630nm
特異性：精準(zhǔn)識(shí)別 bcr-abl 融合蛋白，不識(shí)別單獨(dú) BCR 或 ABL 蛋白
重復(fù)性：板內(nèi) CV＜5%，板間 CV＜7%
注意事項(xiàng)：樣本避免凝血不完全，纖維蛋白會(huì)干擾孔底吸附
儲(chǔ)存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫平衡 27min，拆開酶標(biāo)板包裝，截取對(duì)應(yīng)數(shù)量板條，設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)、樣本、空白三類反應(yīng)孔。
標(biāo)準(zhǔn)孔加入系列濃度 p190/bcr-abl 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL；樣本孔加入細(xì)胞上清稀釋樣本 50μL；空白孔不加液。
非空白孔加入一步法抗原抗體酶結(jié)合工作液 50μL，輕晃混勻，覆膜密封微孔板。
37℃恒溫孵育 60min，全程避光操作。
倒掉孔內(nèi)液體，洗板液浸泡每孔 30s 后拍干，重復(fù)洗板 4 次。
每孔添加顯色液 A、B 各 50μL，遮光搖勻，37℃避光顯色 15min。
加入終止液 50μL 終止顯色，混勻后立即上機(jī)檢測(cè) 450nm 吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算蛋白含量。
關(guān)鍵字： 人癌基因蛋白質(zhì);p190/bcr-abl ;ELISA試劑盒;
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