本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA技術(shù)檢測人樣本中八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)含量。微孔板表面包被OTF2A特異性捕獲抗體，加入待測樣本后，樣本中的OTF2A抗原與固相抗體特異性免疫結(jié)合，經(jīng)洗滌去除游離雜質(zhì)。加入HRP標(biāo)記的OTF2A檢測抗體，形成完整的夾心免疫復(fù)合物，洗滌后加入TMB顯色底物，在酶的催化下發(fā)生顯色反應(yīng)，終止反應(yīng)后通過酶標(biāo)儀檢測吸光度。顯色強(qiáng)度與樣本中OTF2A濃度呈正相關(guān)，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線可完成精準(zhǔn)定量檢測。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E2611 |
英文名稱 | OTF2A ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：≤7pg/mL
檢測范圍：25pg/mL–1400pg/mL
反應(yīng)時間：封閉后樣本孵育 90min，二抗 50min，避光顯色 19min
顯色系統(tǒng)：單組份 TMB 底物
檢測波長：450nm
特異性：特異性綁定 OTF2A 亞型，不識別 OTF2B
重復(fù)性：板內(nèi) CV≤5.6%，板間 CV≤7.7%
注意事項(xiàng)：組織勻漿樣本需去除脂質(zhì)層后再稀釋上樣
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫放置 26min 回溫，取出酶標(biāo)板固定于板架，編號標(biāo)記各類反應(yīng)孔。
標(biāo)準(zhǔn)品孔加入系列稀釋 OTF2A 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL；樣本孔加入核蛋白提取稀釋樣本 50μL；空白孔不加液。
檢測孔加入一步法酶偶聯(lián)一抗工作液 50μL，輕晃酶板混勻，覆膜密封微孔。
37℃恒溫孵育 57min，全程酶標(biāo)板不可傾斜移位。
棄除孔內(nèi)液體，洗板液浸泡 30s 后拍干，重復(fù)洗板 4 次。
每孔添加顯色 A 液、B 液各 50μL，避光混勻，37℃避光顯色 13min。
滴加終止液 50μL 終止反應(yīng)，混勻后 10min 內(nèi) 450nm 讀數(shù)，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算 OTF2A 濃度。
關(guān)鍵字： 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子;OTF2A;ELISA試劑盒;
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