本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA技術(shù)原理，微孔板預先固定人蛋白酪氨酸磷酸酶特異性捕獲抗體，加入待測樣本與梯度標準品，樣本中的PTP抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌后加入酶標檢測抗體形成夾心復合物，再次洗板去除未結(jié)合酶標抗體，加入顯色底物發(fā)生催化顯色反應，顯色強度與樣本中PTP濃度正相關(guān)，通過吸光度檢測與標準曲線比對實現(xiàn)定量檢測。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP/PTPase/CD148)ELISA試劑盒

英文名稱：PTP/PTPase Elisa Kit
貨號：Y-E3033

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：≤0.14ng/mL

檢測范圍：0.28ng/mL - 18ng/mL

反應時間：總時長 118min（樣本 63min，二抗 35min，顯色 20min）

顯色系統(tǒng)：標準 HRP 偶聯(lián) TMB 顯色

檢測波長：450nm+630nm 雙波長

特異性：特異性結(jié)合 CD148 型 PTP，不結(jié)合其他磷酸酶亞型

重復性：板內(nèi) CV＜6.6%，板間 CV＜8.3%

注意事項：終止后 15min 內(nèi)必須完成酶標儀讀數(shù)，否則 OD 值衰減
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復凍融≥3 次會導致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導致試劑盒完全失效。
實驗步驟如下：

試劑盒室溫平衡 30min，配比稀釋濃縮洗滌液，配制 PTP 梯度標準品，酶標板分區(qū)標記。

標準孔、樣本孔、空白孔分別加對應液體，每孔加入一步法酶標記工作液，封板膜密封。

37℃避光孵育 52min，完成免疫結(jié)合反應。

棄液洗板，每孔加滿洗滌液靜置 28s，洗板 4 次后拍干殘留液體。

加入顯色液，混勻后 37℃避光顯色 12min。

加入終止液終止顯色，充分混勻板面。

450nm 酶標儀讀取 OD 值，標準曲線法計算 PTP 含量。
公司正在出售的產(chǎn)品：