本試劑盒運用雙抗體夾心酶免疫分析法原理，微孔板預(yù)先包被純化的人FASL特異性捕獲抗體，加入待測樣本和標(biāo)準(zhǔn)品后，樣本中的FASL抗原與固相捕獲抗體特異性結(jié)合，經(jīng)洗滌去除未結(jié)合的無關(guān)物質(zhì)，再加入酶標(biāo)記檢測抗體，與結(jié)合的抗原形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，底物顯色后產(chǎn)生有色產(chǎn)物，產(chǎn)物吸光度與樣本中FASL濃度呈正相關(guān)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合計算，即可準(zhǔn)確測定樣本中人FASL的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒
英文名稱：FASL Elisa Kit
貨號：Y-E172
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：檢出下限≤0.08ng/L
檢測范圍：0.25ng/L～16ng/L
反應(yīng)時間：樣本 37℃孵育 90min，酶結(jié)合物 37℃30min，顯色室溫 10min
顯色系統(tǒng)：單瓶預(yù)混 TMB 顯色底物
檢測波長：主波長 450nm，參比 600nm
特異性：特異性針對人 FASL，與 TNF-α、TRAIL 無交叉識別
重復(fù)性：板內(nèi) CV＜5.5%，板間 CV＜9.5%
注意事項：血清樣本需離心去除血凝塊雜質(zhì)，否則易出現(xiàn)非特異吸光值偏高
儲存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
實驗步驟如下：
試劑盒試劑室溫放置 35min 回溫，濃縮洗滌液純水稀釋配制工作洗滌液，取出實驗酶標(biāo)板條，未使用微孔板密封冷藏。
劃分孔位組別，標(biāo)準(zhǔn)品孔加入梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，樣本孔加入待測上清 / 血清樣本 50μL，空白孔不添加任何溶液。
所有反應(yīng)孔直接加入一步法酶聯(lián)試劑 100μL，手動輕晃酶標(biāo)板混勻液體，封板膜嚴(yán)實封口。
37℃恒溫孵育 70min，孵育環(huán)境避光防塵，保證反應(yīng)體系穩(wěn)定結(jié)合。
去除封板膜，倒掉孔中廢液，加滿洗滌液浸泡 35s 后用力拍干，重復(fù)洗板 6 次，微孔內(nèi)無掛液水珠。
依次添加顯色 A 液、B 液各 50μL，避光震蕩混勻，37℃避光顯色 18min，觀察孔內(nèi)呈現(xiàn)藍色漸變。
滴加終止液 50μL 終止反應(yīng)，溶液由藍變黃后立即上機，450nm 檢測 OD 值，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線計算 FASL 濃度。
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關(guān)鍵字： 人凋亡相關(guān)因子配體;FASL;ELISA試劑盒;
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