本試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，將純化的HDV特異性抗原包被于微孔板，作為固相反應(yīng)載體，加入待測(cè)血清樣本后，樣本中特異性的HDV IgG抗體可與固相HDV抗原特異性結(jié)合，洗板去除未結(jié)合雜質(zhì)，再加入酶標(biāo)記的抗人IgG二抗，與樣本結(jié)合的IgG抗體特異性結(jié)合，底物顯色后終止反應(yīng)，檢測(cè)吸光度值，結(jié)合陽性、陰性對(duì)照及標(biāo)準(zhǔn)曲線，判定并定量檢測(cè)樣本中HDV IgG抗體的含量。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人丁型肝炎IgG(HDV IgG)ELISA試劑盒

英文名稱：HDV IgG  Elisa Kit
貨號(hào)：Y-E624

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：符合臨床血清陽性檢出臨界值，最低陽性滴度 1:10

檢測(cè)范圍：陰性質(zhì)控～強(qiáng)陽性血清梯度稀釋 1:10 至 1:640

反應(yīng)時(shí)間：樣本 37℃60min，酶結(jié)合物 37℃40min，顯色 12min

顯色系統(tǒng)：醫(yī)用級(jí) HRP-TMB 顯色系統(tǒng)

檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm，550nm 輔助扣除本底

特異性：僅結(jié)合 HDV 特異性 IgG 抗體，與甲肝、乙肝、丙肝抗體無交叉反應(yīng)

重復(fù)性：批內(nèi) CV＜7.5%，批間 CV＜12%

注意事項(xiàng)：僅用于體外檢測(cè)，不可用于靜脈注射；溶血、脂血標(biāo)本慎用
通用注意事項(xiàng)：

樣本要求

血清、血漿避免嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會(huì)導(dǎo)致抗原降解，檢測(cè)值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴(yán)格 37℃，溫箱溫度波動(dòng)、室溫過低會(huì)降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標(biāo)樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會(huì)造成高背景、假陽性；拍干時(shí)使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實(shí)驗(yàn)耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護(hù)

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實(shí)驗(yàn)廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標(biāo)準(zhǔn)品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標(biāo)準(zhǔn)孔時(shí)，必須稀釋重測(cè)，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測(cè)限標(biāo)注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對(duì)照

空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實(shí)驗(yàn)作廢重做。

儲(chǔ)存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會(huì)造成酶標(biāo)抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：

試劑盒試劑室溫平衡 32min，稀釋洗滌液，取出酶聯(lián)反應(yīng)板，未使用板條密封存放于 2~8℃環(huán)境。

設(shè)立空白孔、陽性對(duì)照孔、陰性對(duì)照孔、待測(cè)樣本孔，每孔加入對(duì)應(yīng)質(zhì)控品、待測(cè)血清樣本 50μL，空白孔不加液。

直接向各反應(yīng)孔加入酶標(biāo)記抗原工作液 100μL，混勻后封板膜密封酶標(biāo)板。

37℃恒溫孵育 60min，避免陽光直射干擾免疫結(jié)合反應(yīng)。

棄去孔內(nèi)反應(yīng)液，洗滌液注滿微孔靜置 35s 拍干，連續(xù)洗板 5 次，去除非特異性吸附物質(zhì)。

每孔加入顯色底物 A、B 液各 50μL，避光混勻，37℃避光顯色 15min。

加入終止液 50μL 終止反應(yīng)，450nm 讀取吸光值，依據(jù)臨界值判定樣本 HDV IgG 陰陽性與含量。
公司正在出售的產(chǎn)品：