本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理，微孔板固相包被人MRP特異性單克隆抗體，加入待測細(xì)胞、組織樣本及標(biāo)準(zhǔn)品，樣本中的MRP抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌純化后加入酶標(biāo)記二抗，構(gòu)建免疫復(fù)合物并催化底物顯色，吸光度數(shù)值與樣本中MRP濃度呈正相關(guān)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線換算即可定量檢測人MRP的表達(dá)水平。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)ELISA試劑盒
英文名稱：MRP ELISA Kit
貨號：Y-E3523
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：檢測下限 0.04ng / 孔
檢測范圍：0.125ng/mL～8ng/mL
反應(yīng)時間：37℃樣本 80min，二抗 47min，顯色 16min
顯色系統(tǒng)：即用型 TMB 顯色液
檢測波長：450nm+600nm 雙波長
特異性：主要識別 MRP1，與 P-gp、BCRP 無交叉識別
重復(fù)性：板內(nèi) CV＜5.5%，板間 CV＜9.5%
注意事項：腫瘤組織樣本充分勻漿裂解，保證膜蛋白充分釋放
關(guān)鍵注意事項：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
實驗步驟如下：
試劑盒試劑室溫放置 30min，稀釋洗滌液，拆分酶標(biāo)板，非實驗用板條密封 2~8℃避光存放。
梯度標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)孔 50μL，細(xì)胞上清待測樣本加入樣本孔 50μL，空白孔空置。
全部反應(yīng)孔添加酶標(biāo)記工作液 100μL，混勻覆膜封板。
37℃孵育 56min，防塵靜置反應(yīng)。
倒掉孔內(nèi)液體，洗板液浸泡 40s 拍干，循環(huán)洗板 5 次。
避光加入顯色 A、B 液各 50μL，混勻顯色 13min。
終止液終止顯色，450nm 測定 OD 值，定量 MRP 表達(dá)量。
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關(guān)鍵字： 人多藥耐藥相關(guān)蛋白;MRP;ELISA試劑盒;
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