本試劑盒以雙抗體夾心ELISA技術(shù)為核心檢測(cè)原理，將人CFD特異性抗體固定于微孔板固相載體，加入待測(cè)樣本后，樣本內(nèi)的人補(bǔ)體因子D可與固相抗體特異性結(jié)合，孵育反應(yīng)后洗滌去除未結(jié)合雜質(zhì)，加入酶標(biāo)檢測(cè)抗體形成夾心免疫復(fù)合物，再次洗滌后加入顯色底物，酶催化底物顯色，顏色深淺對(duì)應(yīng)樣本中CFD的含量高低，通過(guò)酶標(biāo)儀讀數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合，實(shí)現(xiàn)樣本中靶標(biāo)因子的定量分析。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人補(bǔ)體因子D(CFD)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E2751 |
英文名稱 | CFD ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：檢出下限 0.02ng/mL
檢測(cè)范圍：0.08ng/mL–5.12ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：85min，樣本孵育 45min，二抗 30min，顯色 10min
顯色系統(tǒng)：改良 TMB 底物顯色液
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm
特異性：僅結(jié)合人 CFD，與因子 B、因子 H 交叉反應(yīng)低于 1%
重復(fù)性：板內(nèi) CV 4.9%~6.1%，板間 CV 6.8%~7.9%
注意事項(xiàng)：終止后務(wù)必 15min 內(nèi)完成酶標(biāo)儀讀數(shù)；試劑盒 2~8℃避光保存，嚴(yán)禁冷凍。
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過(guò)程中防止污染和揮發(fā)
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
所有試劑常溫平衡 30min，按照說(shuō)明書配比稀釋 CFD 標(biāo)準(zhǔn)品，做好酶標(biāo)板孔位分區(qū)標(biāo)記區(qū)分對(duì)照與待測(cè)樣本。
精準(zhǔn)移液添加梯度 CFD 標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)人體體液樣本、稀釋空白液至對(duì)應(yīng)微孔內(nèi)，加樣避免產(chǎn)生氣泡。
直接加入酶偶聯(lián)檢測(cè)抗體工作液，封板膜封閉酶標(biāo)板，37℃避光孵育 65min 完成一步夾心免疫反應(yīng)。
去除封板倒掉孔中液體，洗板液充分洗滌每孔，每次浸泡 35s，連續(xù)洗板 5 次后倒扣拍干。
每孔加入顯色底物液，遮光條件下室溫顯色 14min，觀察梯度顯色層次。
加入終止液終止顯色，輕敲酶標(biāo)板混勻液體，終止后 10min 內(nèi)完成讀數(shù)。
酶標(biāo)儀讀取 450nmOD 值，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本 CFD 濃度，整理實(shí)驗(yàn)臺(tái)賬。
關(guān)鍵字： 人補(bǔ)體因子D;CFD;ELISA試劑盒;
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