本試劑盒基于經(jīng)典雙抗體夾心ELISA技術(shù),固相微孔板包被人非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)特異性抗體,孵育后樣本中的NNE抗原與固相抗體特異性結(jié)合,結(jié)合酶標檢測抗體形成免疫復合物,經(jīng)洗滌純化后進行酶促顯色反應,依據(jù)吸光度數(shù)值可定量測定樣本中人NNE的含量。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:人非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)ELISA試劑盒
英文名稱:NNE Elisa Kit
貨號:Y-E989
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:檢出下限 0.14ng/mL
檢測范圍:0.6ng/mL - 50ng/mL
反應時間:抗原孵育 72min,二抗 41min,顯色 18min
顯色系統(tǒng):TMB 單組份顯色液,鹽酸終止
檢測波長:450nm+600nm
特異性:區(qū)分 NNE 與神經(jīng)元特異性烯醇化酶 NSE,交叉率<2.7%
重復性:板內(nèi) CV≤6.4%,板間 CV≤8.3%
注意事項:溶血樣本不可使用,紅細胞內(nèi)烯醇化酶會嚴重干擾檢測結(jié)果
關(guān)鍵注意事項:

實驗前需仔細閱讀對應試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
實驗步驟如下:

試劑盒試劑室溫平衡 27min,配比稀釋洗滌液,用稀釋液配制 NNE 梯度標準溶液,排布 96 孔板檢測點位。
各孔添加檢測樣本、標準品、空白稀釋液 50μL,馬上加入一步法酶標記抗體液 100μL,封板密封。
37℃避光孵育 64min,不可中途開啟封板。
棄除廢液,洗滌液加滿每孔浸泡 26s,拍干,洗板 4 次。
加入顯色 A、B 液各 50μL,輕微震蕩后 37℃避光顯色 17min。
加入終止液 50μL 終止顯色反應,混勻液體。
酶標儀 450nm 讀取吸光度,繪制標準曲線定量 NNE 濃度。
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關(guān)鍵字: 人非神經(jīng)元性烯醇化酶;NNE;ELISA試劑盒;
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