本試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附特異性檢測原理,固相微孔板固定人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)特異性捕獲抗體,樣本中的SP-C抗原與固相抗體精準(zhǔn)結(jié)合后,與酶標(biāo)記檢測抗體形成夾心免疫復(fù)合物,去除游離雜質(zhì)后觸發(fā)酶促顯色反應(yīng),依據(jù)吸光度與抗原濃度的正比關(guān)系,定量檢測人SP-C含量。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒
英文名稱:SP-C Elisa Kit
貨號:Y-E331
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最低可測 0.06ng/mL
檢測范圍:0.18ng/mL - 26ng/mL
反應(yīng)時間:封閉 32min,樣本孵育 88min,二抗 43min,顯色 20min
顯色系統(tǒng):TMB A+B 混合顯色液
檢測波長:450nm
特異性:靶向 SP-C 疏水結(jié)構(gòu)域,同源肺表面蛋白交叉率<2.4%
重復(fù)性:板內(nèi) CV≤5.4%,板間 CV≤7.7%
注意事項:樣本避免反復(fù)凍融,SP-C 極易發(fā)生蛋白降解導(dǎo)致結(jié)果偏低
關(guān)鍵注意事項:

實驗前需仔細(xì)閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
實驗步驟如下:

試劑盒所有試劑常溫回溫 35min,配制洗滌工作液與 SP-C 標(biāo)準(zhǔn)梯度液,規(guī)劃酶標(biāo)板復(fù)孔排布。
空白孔加稀釋液 50μL,標(biāo)準(zhǔn)品與樣本孔加對應(yīng)液體 50μL,立刻加入一步法酶工作液 100μL,封板。
37℃隔水避光孵育 66min,孵育箱門關(guān)閉避免漏光。
去除封板棄液,洗滌液浸泡每孔 34s,倒扣拍干,洗板 4 次。
加入顯色 A、B 液各 50μL,混勻后避光顯色 12min。
加入終止液 50μL 混勻終止反應(yīng)。
酶標(biāo)儀 450nm 讀數(shù),擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線得到 SP-C 檢測結(jié)果。
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關(guān)鍵字: 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C;SP-C;ELISA試劑盒;
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