本試劑盒采用間接法ELISA檢測(cè)原理定性、定量檢測(cè)樣本中人庚型肝炎病毒IgM抗體。試劑盒固相板包被純化的HGV特異性抗原，加入待測(cè)樣本后，樣本中的HGV-IgM抗體可與固相抗原特異性結(jié)合，洗去未結(jié)合的非特異性雜質(zhì)，再加入酶標(biāo)記的抗人IgM二抗，與結(jié)合在固相上的IgM抗體發(fā)生特異性結(jié)合，加入底物顯色后，顯色強(qiáng)度與樣本中HGV-IgM抗體含量呈正相關(guān)，據(jù)此可判斷樣本是否存在HGV感染及抗體表達(dá)水平。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人庚型肝炎病毒IgM(HGV-IgM)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E619 |
英文名稱 | HGV-IgG Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：陽(yáng)性參考品最低稀釋度 1:100 可檢出
檢測(cè)范圍：血清稀釋比例 1:50~1:3200
反應(yīng)時(shí)間：樣本孵育 90min，酶結(jié)合物 60min，顯色 15min
顯色系統(tǒng)：TMB 底物顯色，硫酸終止
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm/630nm 雙波長(zhǎng)
特異性：與甲肝、乙肝、丙肝 IgM 抗體無(wú)交叉反應(yīng)
重復(fù)性：同板重復(fù)孔 CV＜7%，批次間 CV＜9%
注意事項(xiàng)：生物樣本按感染性廢棄物處理；弱陽(yáng)性樣本建議復(fù)檢確認(rèn)
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：
1. 試劑平衡與稀釋
試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。
濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋（常見(jiàn) 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。
標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋：
凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；
按說(shuō)明書(shū)梯度倍比稀釋出 5~7 個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
待測(cè)樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。
2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備
設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長(zhǎng)，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動(dòng)洗板槽）、封板膜、離心管。
耗材無(wú)核酸酶、無(wú)熱源、無(wú)蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。
取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。
3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記
酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫平衡 25min，設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照孔、陰性對(duì)照孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)血清樣本孔。
每孔加入 50μL 待測(cè)血清樣本，對(duì)照孔加入對(duì)應(yīng)陰陽(yáng)對(duì)照液，空白孔加稀釋液。
一步加入酶標(biāo)記 HGV 抗原工作液 100μL，封板，37℃孵育 60min 捕獲特異性 IgM 抗體。
棄液洗板 6 次，每次浸泡 30s，拍干微孔無(wú)殘留洗滌液。
每孔添加顯色 A、B 液各 50μL，避光室溫顯色 17min。
加入終止液 50μL 終止酶促反應(yīng)，混勻微孔內(nèi)液體。
450nm 讀取 OD 值，根據(jù)臨界值判定樣本 HGV-IgM 陰陽(yáng)性并定量。
關(guān)鍵字： 人庚型肝炎病毒IgM;HGV-IgM;ELISA試劑盒;
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