本試劑盒采用間接酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)原理，將人肝細(xì)胞膜特異性抗原包被于酶標(biāo)板微孔固相，封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)后加入待測(cè)樣本，樣本中的抗肝細(xì)胞膜抗體可與固相抗原精準(zhǔn)特異性結(jié)合；洗滌去除未結(jié)合的雜蛋白與游離成分，加入酶標(biāo)記抗人二抗孵育結(jié)合，充分洗滌后加入底物進(jìn)行酶促顯色，通過(guò)檢測(cè)吸光度值，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量分析樣本中LMA抗體的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)ELISA試劑盒
英文名稱：LMA Elisa Kit
貨號(hào)：Y-E460
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低可測(cè) 1.1AU/mL
檢測(cè)范圍：1.5AU/mL～24AU/mL
反應(yīng)時(shí)間：包被板結(jié)合樣本 65min；二抗孵育 42min；避光顯色 14min
保存條件：未開(kāi)封 2～8℃；拆開(kāi)板條裝入自封袋加干燥劑冷藏
顯色系統(tǒng)：HRP-TMB 單組分顯色
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：以標(biāo)準(zhǔn)品梯度濃度與 OD 值建立線性標(biāo)準(zhǔn)曲線，代入計(jì)算樣本抗體滴度
注意事項(xiàng)：待測(cè)樣本避免反復(fù)凍融 3 次以上；操作避免陽(yáng)光直射底物液
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過(guò)程中防止污染和揮發(fā)
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
樣本稀釋處理：血清樣本以稀釋液 1:110 稀釋，顛倒混勻，室溫靜置 9min，重度黃疸樣本不宜檢測(cè)。
板孔加樣：預(yù)包被板各孔加入空白液、對(duì)照液、稀釋樣本各 100μL，避免孔間交叉污染。
一步添加酶標(biāo)抗體液：全部孔直接加入酶標(biāo)記二抗 100μL，密封封板，水平震蕩 40s。
孵育反應(yīng)：37℃恒溫避光孵育 65min，保證孵育環(huán)境無(wú)光線照射。
洗板操作：棄液，加滿洗滌液浸泡 30s，拍干，重復(fù)洗板 5 次。
顯色步驟：分加 A、B 顯色液各 50μL，混勻后 37℃避光顯色 13min。
終止檢測(cè)：終止液終止反應(yīng)，5min 內(nèi) 450nm 測(cè) OD 值，比對(duì)臨界值判讀陰陽(yáng)性。
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關(guān)鍵字： 人抗肝細(xì)胞膜抗體;LMA;ELISA試劑盒;
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