本試劑盒運用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)，將CK特異性捕獲抗體固定于微孔板固相表面，加入待測樣本與標(biāo)準(zhǔn)品，樣本中的肌酸激酶抗原與固相抗體特異性結(jié)合，隨后加入酶標(biāo)記CK檢測抗體形成夾心免疫復(fù)合物，經(jīng)洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)后，加入底物進行酶促顯色反應(yīng)，產(chǎn)物吸光度與樣本中CK濃度呈正相關(guān)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算可精準(zhǔn)測定樣本中肌酸激酶的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人肌酸激酶(CK)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E3021 |
英文名稱 | CK Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：≤0.12U/L
檢測范圍：0.5U/L~20U/L
反應(yīng)時間：37℃溫浴 60min；酶標(biāo)抗體 30min；顯色 15min
保存條件：2~8℃冷藏，洗滌液可室溫保存 6 個月，其余組分冷藏
顯色系統(tǒng)：單組份即用型 TMB 顯色液
檢測波長：450nm，參比 650nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：6 個梯度標(biāo)準(zhǔn)品，四參數(shù) Logistic 回歸建標(biāo)曲，酶標(biāo)儀軟件自動計算樣本濃度
注意事項：溶血樣本會造成結(jié)果假性偏高，嚴重溶血樣本直接舍棄
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實驗操作流程：
樣本處理：血清樣本室溫融化，溶血樣本直接廢棄，用樣本稀釋液按比例稀釋后顛倒混勻。
板孔加樣：CK 包被微孔板設(shè)置對照孔，樣本孔與標(biāo)準(zhǔn)品孔各加對應(yīng)液體 100μL，空白孔加稀釋液。
一步添加酶標(biāo)抗體：所有孔位加入 HRP 標(biāo)記抗體工作液 50μL，輕微震蕩混勻。
孵育結(jié)合：封板后 37℃避光孵育 58min。
洗板除雜：洗板 5 次，每次浸泡 30s，徹底拍干微孔。
底物顯色：每孔加顯色 A、B 液各 50μL，避光顯色 12min。
終止檢測：加入終止液，酶標(biāo)儀讀取 450nm 吸光值，定量 CK 濃度。
關(guān)鍵字： 人肌酸激酶;CK;ELISA試劑盒;
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