本試劑盒基于捕獲法ELISA檢測(cè)原理，針對(duì)人流行性出血熱病毒特異性IgM抗體進(jìn)行檢測(cè)，微孔板預(yù)包被抗人IgMμ鏈抗體，可捕獲待測(cè)樣本中所有IgM類抗體；若樣本中存在抗流行性出血熱病毒IgM抗體，將被固相抗體捕獲，隨后加入純化的流行性出血熱病毒特異性抗原，與捕獲的目標(biāo)IgM抗體結(jié)合；再加入酶標(biāo)記抗病毒抗原抗體，形成固相捕獲抗體-目標(biāo)IgM-病毒抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后，吸光度值與樣本中EHF-IgM抗體含量正相關(guān)，可通過標(biāo)準(zhǔn)曲線定量檢測(cè)。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人抗流行性出血熱病毒抗體IgM (EHF)ELISA試劑盒
英文名稱：EHF IgM Elisa Kit
貨號(hào)：Y-E548
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：陽(yáng)性臨界值 OD 差值≥0.1 判定檢出
檢測(cè)范圍：陰性質(zhì)控～強(qiáng)陽(yáng)性質(zhì)控梯度血清稀釋 1:100~1:1600
反應(yīng)時(shí)間：樣本捕獲孵育 90min，酶結(jié)合物 60min，顯色 20min
保存條件：試劑盒 2~8℃，滅活陽(yáng)性對(duì)照血清 - 20℃分裝凍存，避免反復(fù)凍融
顯色系統(tǒng)：TMB 底物顯色系統(tǒng)
檢測(cè)波長(zhǎng)：450/630nm 雙波長(zhǎng)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：采用陽(yáng)性對(duì)照梯度稀釋做半定量曲線，定性檢測(cè)可僅設(shè)置陰陽(yáng)性對(duì)照不做定量曲線
注意事項(xiàng)：樣本必須 56℃30min 滅活處理；操作全程生物安全二級(jí)防護(hù)，防止樣本污染
儲(chǔ)存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒室溫靜置 30min，取出微孔反應(yīng)板，規(guī)劃布局并標(biāo)注孔位，剩余板條密封 2-8℃存放。
待測(cè)稀釋樣本加入對(duì)應(yīng)孔 60μL，陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照孔分別添加對(duì)應(yīng)對(duì)照液 60μL，空白孔空置不加樣。
直接向所有加樣孔加入酶標(biāo)抗體工作液 60μL，封板膜密封，輕柔震蕩酶標(biāo)板混勻體系。
37℃恒溫孵育 65min，孵育期間禁止挪動(dòng)酶標(biāo)板位置。
撕掉封板膜，棄凈孔內(nèi)液體，洗滌液注滿每孔浸泡 30s 棄去，連續(xù)洗板 5 次，拍干殘留洗液。
每孔依次添加顯色 A 液、B 液各 50μL，避光混勻，37℃避光顯色 14min。
加入終止液 50μL 終止反應(yīng)，混勻后酶標(biāo)儀 450nm 讀數(shù)，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品曲線判定樣本 IgM 抗體陽(yáng)性 / 陰性及含量。
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關(guān)鍵字： 人抗流行性出血熱病毒抗體IgM ;EHF;ELISA試劑盒;
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