本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù),微孔板固相包被CKMB特異性捕獲抗體,加入待測樣本后,樣本中的激動異構(gòu)酶CKMB與固相抗體特異性結(jié)合,再加入酶標(biāo)記CKMB檢測抗體形成夾心免疫復(fù)合物,充分洗滌去除未結(jié)合游離組分后,底物發(fā)生酶促顯色反應(yīng),顯色強(qiáng)度與樣本中CKMB濃度成正比,通過吸光度檢測與標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算可實(shí)現(xiàn)定量分析。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人激動異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB(CKMB)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E3058 |
英文名稱 | CKMB Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:0.08U/L
檢測范圍:0.25U/L~8U/L
反應(yīng)時間:37℃樣本孵育 74min;酶標(biāo)二抗 37min;避光顯色 13min
保存條件:試劑盒 2~8℃,顯色液需避光單獨(dú)存放
顯色系統(tǒng):TMB 單組份顯色液
檢測波長:450nm/630nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:線性回歸法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,超線性范圍樣本做梯度稀釋復(fù)測
注意事項(xiàng):黃疸、脂血嚴(yán)重樣本不建議用于本試劑盒檢測,干擾顯色讀數(shù)
關(guān)鍵注意事項(xiàng):
本試劑盒僅科研體外檢測,嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射,TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用,杜絕交叉污染;所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃,溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分,殘液會造成非特異性結(jié)合,背景偏高。
終止后需快速讀數(shù),放置過久吸光度會漂移,結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸,避免接觸皮膚、眼睛,若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2~8℃冷鏈,嚴(yán)禁高溫暴曬。
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實(shí)驗(yàn)操作流程:
樣本預(yù)處理:無溶血血清樣本稀釋處理,離心去除微量纖維蛋白雜質(zhì)。
酶標(biāo)板加樣:CKMB 預(yù)包被板分設(shè)孔位,標(biāo)準(zhǔn)品與待測樣本每孔加液 100μL,空白孔補(bǔ)稀釋液。
一步添加酶標(biāo)記抗體:所有孔位加入 HRP 標(biāo)記二抗 50μL,封板膜密封。
恒溫避光孵育:37℃孵育 59min。
洗板流程:洗板 5 次,浸泡 28s 后拍干廢液。
顯色反應(yīng):加入顯色底物避光顯色 14min。
終止檢測:終止液終止顯色,酶標(biāo)儀測定吸光度,計(jì)算 CKMB 濃度。
關(guān)鍵字: 人激動異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB;CKMB;ELISA試劑盒;
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