本試劑盒基于競爭酶聯(lián)免疫吸附法原理進行檢測,將特異性識別甲肟前列腺素D2的抗體固定于微孔板固相載體上,向孔內加入待測樣本和酶標記PGD2-MOX抗原,樣本中的靶標物質與酶標記抗原競爭結合固相抗體的特異性結合位點;經過恒溫孵育、充分洗滌去除未結合組分后,加入顯色底物催化顯色,酶促反應的顯色強度與樣本中甲肟前列腺素D2含量成反比,通過檢測吸光度數(shù)值,匹配標準曲線即可定量分析樣本中靶標的濃度水平。
產品參數(shù):
產品名稱 | 人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E2927 |
英文名稱 | PGD2-MOX ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最小檢測值 7.2pg/mL
檢測范圍:15~480pg/mL
反應時間:包被板加樣孵育 90min,酶標二抗 60min,避光顯色 20min
保存條件:試劑盒 2~8℃避光;標準品干粉 - 20℃分裝凍存,溶解后一次性使用
顯色系統(tǒng):HRP 催化 TMB 顯色,酸性終止后由藍轉黃
檢測波長:450nm,建議 570nm 做空白校正
標準曲線繪制:選用二次多項式擬合標準曲線,梯度標準品對應 OD 值錄入軟件生成擬合方程
注意事項:樣本采集后立即酸化處理;全程避光操作防止前列腺素降解;板條剩余部分密封防潮冷藏
試劑盒組成:
預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原,結合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線,定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結合目標物,提供酶結合位點
辣根過氧化物酶(HRP)標記親和素 1瓶 與生物素結合,催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物,產生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應,穩(wěn)定顯色結果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板,去除未結合物質
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實驗操作流程:
試劑盒室溫放置 28min,分裝酶標條,劃分標準孔、樣本孔、空白對照孔,每孔加入預處理待測樣本 100μL,空白孔加入稀釋緩沖液。
直接向全部加樣孔加入酶偶聯(lián)抗體工作液 50μL,橫向緩慢晃動酶標板混勻液體,使用封板膜嚴實密封板面。
37℃條件下水浴孵育 65min,保證酶標板底面完全貼合水浴板架,保證溫度一致。
去除封板膜,倒掉孔內反應液,每孔加滿洗滌液浸潤 35s 后倒扣拍干,連續(xù)洗板 5 輪,嚴禁孔內留存洗滌廢液。
每孔分別添加底物顯色 A 液、B 液各 50μL,遮光條件下 37℃孵育 18min 進行顯色反應。
按順序每孔加入終止液 50μL,輕震酶標板混勻,強制終止底物催化顯色過程。
15min 內使用酶標儀 450nm 讀值,空白孔歸零,依據(jù)標準曲線定量樣本 PGD2-MOX 含量。
關鍵字: 人甲肟前列腺素D2;PGD2-MOX;ELISA試劑盒;
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