本試劑盒采用間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，將純化的GM1神經(jīng)節(jié)苷脂抗原包被于微孔板固相載體，待測樣本中的抗GM1神經(jīng)節(jié)苷脂抗體可與固相抗原特異性免疫結(jié)合；孵育完成后洗板清除非特異性結(jié)合成分，加入酶標(biāo)記抗人二抗與固相上的目標(biāo)抗體結(jié)合，構(gòu)建抗原-抗體-酶標(biāo)二抗復(fù)合物；底物顯色反應(yīng)后，顯色強(qiáng)度與樣本中GM1抗體含量成正比，終止反應(yīng)后檢測吸光度，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線完成定量檢測。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體(GM1)ELISA試劑盒

英文名稱：GM1   Elisa Kit
貨號(hào)：Y-E409

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：0.5EU/mL

檢測范圍：1EU/mL - 32EU/mL

反應(yīng)時(shí)間：37℃孵育 85min，二抗 45min，顯色 19min

保存條件：2~8℃避光密封，包被板嚴(yán)禁受潮，受潮直接報(bào)廢

顯色系統(tǒng)：雙組分底物顯色體系

檢測波長：450nm

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品，線性回歸擬合，R2 需≥0.99 方可有效

注意事項(xiàng)：吉蘭巴雷綜合征常用篩查項(xiàng)目，外周神經(jīng)損傷會(huì)造成假陽性升高
通用注意事項(xiàng)：

樣本要求

血清、血漿避免嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會(huì)導(dǎo)致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴(yán)格 37℃，溫箱溫度波動(dòng)、室溫過低會(huì)降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標(biāo)樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會(huì)造成高背景、假陽性；拍干時(shí)使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實(shí)驗(yàn)耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護(hù)

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實(shí)驗(yàn)廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標(biāo)準(zhǔn)品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標(biāo)準(zhǔn)孔時(shí)，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標(biāo)注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對(duì)照

空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實(shí)驗(yàn)作廢重做。

儲(chǔ)存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會(huì)造成酶標(biāo)抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：

試劑盒室溫放置 36min，取出預(yù)裝微孔板，規(guī)劃實(shí)驗(yàn)排布并標(biāo)注孔號(hào)，剩余板條密封避光冷藏。

稀釋待測樣本加入樣本孔 62μL，陰陽性對(duì)照孔添加對(duì)應(yīng)對(duì)照液 62μL，空白孔不加液。

一步法直接添加酶標(biāo)記結(jié)合液 62μL 至所有加樣孔，覆膜封口，輕微搖晃酶標(biāo)板混勻體系。

37℃恒溫避光孵育 64min，防止光照破壞底物與酶活性。

撕膜倒凈廢液，洗滌液注滿每孔浸泡 31s 棄去，重復(fù)洗板 6 次，充分拍干微孔內(nèi)部殘留液體。

每孔加入顯色混合液 100μL，37℃避光顯色 14min。

滴加終止液 50μL 終止反應(yīng)，搖勻后 15min 內(nèi) 450nm 讀取吸光度，參照標(biāo)準(zhǔn)曲線定量 GM1 抗體數(shù)值。
公司正在出售的產(chǎn)品：