本試劑盒采用經(jīng)典雙抗體夾心ELISA原理，微孔板包被人角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子特異性捕獲抗體，加入待測(cè)樣本后，樣本中的KGF抗原與固相抗體特異性結(jié)合；洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)后，加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的KGF檢測(cè)抗體，形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物；后續(xù)經(jīng)顯色、終止、吸光度檢測(cè)，吸光度值與樣本中角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子含量正相關(guān)，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)可定量檢測(cè)靶標(biāo)因子濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E065 |
英文名稱(chēng) | KGF Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最小檢出 0.2ng/L
檢測(cè)范圍：0.4~25.6ng/L
反應(yīng)時(shí)間：樣本孵育 110min，酶抗體 65min，避光顯色 22min
保存條件：試劑盒 2~8℃避光，禁止橫置存放微孔板
顯色系統(tǒng)：A 液底物 + B 液增強(qiáng)劑組合顯色
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm，580nm 參比校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制：四參數(shù) Logistic 擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，空白孔調(diào)零后定量計(jì)算
注意事項(xiàng)：細(xì)胞培養(yǎng)上清需去除細(xì)胞碎片；洗板徹底防止非特異吸附；實(shí)驗(yàn)耗材一次性使用
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過(guò)程中防止污染和揮發(fā)
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒室溫平衡 30min，取出酶標(biāo)板，設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔、空白孔，每孔加稀釋后樣品 100μL，空白孔加稀釋液。
直接加入酶標(biāo)記抗體工作液 50μL，混勻封板。
37℃孵育 60min，單層放置酶標(biāo)板防止受熱不均。
揭膜棄液，洗板液加滿(mǎn)每孔靜置 30s，甩干，洗板 5 次后徹底扣干。
每孔加顯色 A、B 液各 50μL，避光顯色 15min。
加入終止液 50μL 混勻終止反應(yīng)。
450nm 讀值，依托標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)定量 KGF 濃度。
關(guān)鍵字： 人角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子;KGF;ELISA試劑盒;
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