本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測原理，微孔板預先包被人β晶體蛋白特異性捕獲抗體，加入待測樣本后，樣本中的Cryβ抗原與固相抗體特異性結合；充分孵育并洗滌純化體系后，加入酶標記Cryβ檢測抗體，形成夾心式免疫復合物；通過酶促顯色反應生成有色產物，吸光度值與樣本中β晶體蛋白含量呈正相關，對照標準曲線可精準定量樣本中靶蛋白濃度。
產品參數(shù)：

?靈敏度：最低可測 3.6pg/mL

檢測范圍：7.2~461pg/mL

反應時間：溫育 68min，酶結合物 33min，顯色 11min

保存條件：整套試劑 2~8℃，稀釋后洗滌液不可長期存放

顯色系統(tǒng)：A+B 等量混合后進行顯色反應

檢測波長：450nm 單一波長檢測吸光度

標準曲線繪制：二次多項式擬合標準曲線，梯度標品錄入后生成換算公式

注意事項：樣本避免反復凍融；加樣時不要觸碰微孔板包被底面；底物液避免接觸皮膚
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設備準備

設備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差）。

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實驗操作流程：

試劑盒常溫放置 30min，取用酶標板條，排布標準品孔、待測樣本孔、空白孔，每孔加入稀釋后樣品 100μL，空白孔添加稀釋緩沖液。

直接向各孔加入酶結合抗體液 55μL，輕柔搖勻后封板密封。

37℃避光孵育 64min，酶標板放置平穩(wěn)不可移位。

撕膜倒凈廢液，洗板液加滿每孔靜置 30s，拍干，重復洗板 5 次。

依次添加顯色 A、B 液各 50μL，避光 37℃顯色 17min。

每孔加入終止液 50μL，混勻終止顯色過程。

450nm 酶標儀測定吸光值，空白調零，對照標準曲線定量 Cryβ 濃度。