本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA檢測原理，酶標板微孔固定IgHV特異性抗體，孵育時樣本中的免疫球蛋白重鏈可變區(qū)抗原與固相抗體特異性結合，再加入酶標記抗體形成免疫復合物，洗滌去除雜質(zhì)后啟動酶促顯色反應，顯色深淺對應樣本中IgHV含量，通過酶標儀讀數(shù)和標準曲線換算完成精準定量。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：0.27 ng/L

檢測范圍：4ng/L～260ng/L

反應時間：37℃孵育 98min，酶結合物 52min，顯色 15min，總 165min

保存條件：避光 2～8℃保存，底物液單獨避光存放

顯色系統(tǒng)：TMB 單組份顯色液終止后讀數(shù)

檢測波長：450nm

標準曲線繪制：6 梯度標準品，非線性回歸繪制曲線

注意事項：微孔板孵育必須加蓋封板膜，防止液體揮發(fā)
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設備準備

設備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

試劑回溫與稀釋：試劑盒全部組分室溫放置 30min，稀釋洗滌液，配制 IgHV 梯度標準品。

板孔點樣：每孔加入標準品、待測樣本、空白試劑 100μL，做好編號記錄。

一步共孵加酶抗：所有反應孔加入酶標記 IgHV 抗體 100μL，封板震蕩 30s 混勻。

恒溫避光孵育：37℃孵育 50min。

洗板除雜：棄凈孔內(nèi)液體，洗液浸泡 25s 拍干，洗板 5 次。

TMB 顯色：加入顯色混合底物，避光顯色 16min。

終止檢測：加入終止液終止反應，450nm 測定 OD 值，定量 IgHV 含量。