本試劑盒采用經(jīng)典雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，酶標(biāo)板預(yù)先包被人IAP特異性抗體，待測(cè)樣本中的免疫抑制酸性蛋白與固相抗體特異性結(jié)合，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記檢測(cè)抗體形成夾心復(fù)合物，洗滌去除非特異性結(jié)合成分后，底物酶促顯色，終止后檢測(cè)吸光度，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線定量樣本中IAP的含量水平。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人免疫抑制酸性蛋白(IAP)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E3515 |
英文名稱 | IAP ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：0.63 μg/L
檢測(cè)范圍：8μg/L～420μg/L
反應(yīng)時(shí)間：樣本孵育 82min，二抗 41min，顯色 17min，總 140min
保存條件：2～8℃密封冷藏，終止液常溫儲(chǔ)存
顯色系統(tǒng)：雙組份 TMB 顯色體系
檢測(cè)波長：450nm+600nm 雙波長校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：7 個(gè)校準(zhǔn)濃度，四參數(shù)擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線
注意事項(xiàng)：不可使用含防腐劑疊氮鈉的待測(cè)樣本
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測(cè)，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會(huì)降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會(huì)造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會(huì)漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
樣本預(yù)處理：體液樣本 4000r/min 離心 10min 取上清，稀釋待測(cè)樣本；梯度稀釋 IAP 標(biāo)準(zhǔn)品。
加樣上板：酶標(biāo)板對(duì)應(yīng)微孔加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣品、空白對(duì)照 100μL。
酶結(jié)合物添加：每孔加入酶標(biāo)記 IAP 特異性抗體 100μL，密封封板膜。
免疫孵育：37℃避光孵育 72min。
洗板操作：倒掉廢液，洗液浸泡 30s 拍干，連續(xù)洗滌 4 次。
底物顯色：加入顯色工作液，暗處顯色 12min。
終止讀數(shù)：終止液終止酶反應(yīng)，450nm 測(cè)吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 IAP 濃度。
關(guān)鍵字： 人免疫抑制酸性蛋白;IAP;ELISA試劑盒;
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