本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測原理,酶標板微孔預先固定ENK特異性捕獲抗體,待測樣本中的腦啡肽抗原與固相抗體特異性結合,加入酶標記檢測抗體形成夾心免疫復合物,洗滌去除游離組分后,酶催化底物產生有色產物,顯色深淺與樣本中ENK濃度正相關,通過吸光度檢測和標準曲線擬合實現(xiàn)精準定量。
產品參數:
產品名稱 | 人腦啡肽(ENK)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E207 |
英文名稱 | ENK Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:<0.08 pg/mL
檢測范圍:0.2pg/mL~40pg/mL
反應時間:37℃孵育 140min,二抗 70min,顯色 14min,總 224min
保存條件:試劑盒 2~8℃,多肽標準品 - 20℃分裝凍存
顯色系統(tǒng):TMB 雙組份顯色體系
檢測波長:450nm/650nm 雙波長
標準曲線繪制:8 個低濃度梯度,四參數擬合標準曲線
注意事項:腦組織樣本需冰上勻漿提取,防止肽類降解失活
試劑盒組成:
預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原,結合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線,定量檢測依據
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結合目標物,提供酶結合位點
辣根過氧化物酶(HRP)標記親和素 1瓶 與生物素結合,催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物,產生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應,穩(wěn)定顯色結果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板,去除未結合物質
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實驗操作流程:
試劑調配:稀釋洗滌液,梯度稀釋 ENK 標準品,腦脊液樣本低速離心取上清稀釋備用。
板孔加樣:各微孔加入標準品、待測樣本、空白試劑 100μL。
一步法酶抗添加:每孔加入酶標記抗 ENK 抗體 100μL,封板密封。
恒溫避光孵育:37℃孵育 53min。
洗板除雜:倒掉廢液,洗液浸泡 35s 拍干,重復洗板 5 次。
顯色反應:加入顯色混合液,避光顯色 17min。
終止檢測:終止液終止酶促反應,450nm 測吸光度,計算 ENK 含量。
關鍵字: 人腦啡肽;ENK;ELISA試劑盒;
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