本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測原理，固相酶標(biāo)板包被人OCT特異性抗體，待測樣本中的鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶與包被抗體特異性結(jié)合，加入酶標(biāo)記配對抗體形成夾心免疫結(jié)構(gòu)，洗滌去除雜質(zhì)后催化底物顯色，顯色深淺與樣本中OCT含量呈正相關(guān)，通過酶標(biāo)儀讀數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合完成定量檢測。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：2.3 U/L

檢測范圍：6U/L～220U/L

反應(yīng)時間：樣本孵育 96min，二抗 50min，顯色 21min，總 167min

保存條件：2～8℃冷藏，酶類標(biāo)準(zhǔn)品避免反復(fù)凍融

顯色系統(tǒng)：OPD 顯色底物終止后檢測

檢測波長：492nm

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：5 個酶活梯度，線性擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線

注意事項：肝組織樣本需低溫制備，防止酶蛋白失活
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會導(dǎo)致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴(yán)格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標(biāo)樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護(hù)

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標(biāo)準(zhǔn)品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標(biāo)準(zhǔn)孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標(biāo)注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標(biāo)抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

試劑稀釋：濃縮洗滌液用純水稀釋至使用濃度，梯度稀釋 OCT 標(biāo)準(zhǔn)品，血清樣本混勻備用。

加樣上板：酶標(biāo)板對應(yīng)微孔加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣品、空白對照 100μL。

一步法酶抗加入：每孔添加酶標(biāo)記 OCT 檢測抗體 100μL，封板封口。

恒溫結(jié)合孵育：37℃避光孵育 51min。

洗板流程：倒掉廢液，洗液浸泡 35s 拍干，循環(huán)洗板 6 次。

顯色反應(yīng)：加入 TMB 顯色混合液，避光顯色 18min。

終止讀數(shù)：終止液終止酶反應(yīng)，450nm 測 OD 值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線定量 OCT。