本試劑盒依托雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測原理，固相酶標板預包被人凝血因子Ⅶ特異性捕獲抗體，孵育時樣本中的FⅦ抗原與固相抗體特異性結合，加入酶標記檢測抗體形成免疫復合物，洗滌去除雜質后啟動酶促顯色反應，顯色深淺對應樣本中FⅦ含量，通過標準曲線換算完成精準定量。
產品參數：

?靈敏度：0.21 μg/mL

檢測范圍：1.5μg/mL～155μg/mL

反應時間：37℃孵育 104min，二抗 48min，顯色 15min，總 167min

保存條件：2～8℃冷藏，凝血因子標準品 - 20℃凍存

顯色系統(tǒng)：單組份 TMB 顯色終止

檢測波長：450nm 單波長讀數

標準曲線繪制：6 梯度標準品，線性擬合曲線

注意事項：血漿必須使用枸櫞酸鈉抗凝，比例 1:9 嚴格配比
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現配現用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設備準備

設備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差）。

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實驗操作流程：

試劑與樣本準備：試劑盒室溫平衡 28min，稀釋洗滌液，梯度配制 FⅦ 標準品，血漿樣本低溫離心取上清。

微孔加樣：標準孔、樣本孔、空白孔分別加入 100μL 對應液體。

一步法酶抗加入：每孔添加 HRP 標記 FⅦ 檢測抗體 100μL，封板封口震蕩 30s。

恒溫結合孵育：37℃避光孵育 57min。

洗板步驟：倒掉廢液，洗液浸泡 35s 拍干，循環(huán)洗板 6 次。

TMB 顯色：加入顯色 A、B 液各 50μL，暗處顯色 18min。

終止定量：終止液終止酶反應，450nm 測 OD 值，換算凝血因子 Ⅶ 濃度。