本試劑盒基于間接酶聯(lián)免疫吸附原理，微孔板預(yù)先包被柯薩奇病毒特異性抗原，待測(cè)樣本中的柯薩奇病毒IgG抗體（Cox V-IgG）與固相抗原特異性結(jié)合，形成抗原-抗體復(fù)合物，洗滌后加入酶標(biāo)記抗人IgG二抗，催化底物顯色，通過(guò)檢測(cè)吸光度值，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線定量檢測(cè)樣本中Cox V-IgG抗體含量。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：檢出限 0.2 AU/mL

檢測(cè)范圍：0.125 AU/mL ~ 8 AU/mL

反應(yīng)時(shí)間：孵育 70min，二抗 35min，顯色 13min

保存條件：2~8℃避光，微孔板干燥劑密封存放

顯色系統(tǒng)：?jiǎn)谓M分 TMB 顯色體系

檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：設(shè)置陰陽(yáng)對(duì)照 + 梯度標(biāo)準(zhǔn)品，擬合曲線定量并判定陰陽(yáng)性

注意事項(xiàng)：急性期與恢復(fù)期血清建議配對(duì)檢測(cè)，提升結(jié)果參考性
通用注意事項(xiàng)：

樣本要求

血清、血漿避免嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會(huì)導(dǎo)致抗原降解，檢測(cè)值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴(yán)格 37℃，溫箱溫度波動(dòng)、室溫過(guò)低會(huì)降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標(biāo)樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會(huì)造成高背景、假陽(yáng)性；拍干時(shí)使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實(shí)驗(yàn)耗材無(wú) DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護(hù)

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實(shí)驗(yàn)廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標(biāo)準(zhǔn)品梯度無(wú)明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標(biāo)準(zhǔn)孔時(shí)，必須稀釋重測(cè)，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測(cè)限標(biāo)注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對(duì)照

空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說(shuō)明洗滌不充分或試劑污染，實(shí)驗(yàn)作廢重做。

儲(chǔ)存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會(huì)造成酶標(biāo)抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實(shí)驗(yàn)操作流程：

所有試劑室溫放置 23min，按需取用酶標(biāo)板條，劃分各組實(shí)驗(yàn)孔。

孔內(nèi)加入稀釋后待測(cè)血清 / 質(zhì)控品 50μL，同步加入酶標(biāo)記液 50μL，封板封口。

搖勻后 37℃孵育 55min。

倒凈液體，洗液浸泡 25s，拍干，洗板 4 次。

顯色底物 A、B 各 50μL，避光顯色 12min。

終止液 50μL 每孔添加終止。

450nm 波長(zhǎng)讀數(shù)，對(duì)照臨界值判定 IgG 陰陽(yáng)性并定量。