本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附原理,預(yù)先將抗人sp185/HER-2單克隆抗體包被于微孔板,待測樣本中的可溶性蛋白185(sp185)抗原與固相抗體特異性結(jié)合,加入酶標(biāo)記檢測抗體形成夾心復(fù)合物,經(jīng)顯色反應(yīng)后測定吸光度,對照標(biāo)準(zhǔn)曲線定量檢測樣本中sp185蛋白的濃度。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E2960 |
英文名稱 | sp185/HER-2 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:檢出限≤0.2 ng/mL
檢測范圍:0.156 ng/mL ~ 10 ng/mL
反應(yīng)時間:樣本孵育 85min,二抗 50min,顯色 20min
保存條件:2~8℃儲存,未用完微孔板密封防潮,防止干孔
顯色系統(tǒng):TMB 顯色底物體系
檢測波長:450nm/630nm 雙波長讀數(shù)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:標(biāo)準(zhǔn)品倍比稀釋,軟件擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量分析
注意事項(xiàng):腫瘤組織上清樣本建議低速離心去除雜質(zhì)后加樣
關(guān)鍵注意事項(xiàng):
本試劑盒僅科研體外檢測,嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射,TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用,杜絕交叉污染;所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃,溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分,殘液會造成非特異性結(jié)合,背景偏高。
終止后需快速讀數(shù),放置過久吸光度會漂移,結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸,避免接觸皮膚、眼睛,若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2~8℃冷鏈,嚴(yán)禁高溫暴曬。
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實(shí)驗(yàn)操作流程:
所有試劑室溫平衡 30min,取出酶標(biāo)板,劃分梯度標(biāo)準(zhǔn)孔與待測樣本孔。
每孔加入標(biāo)準(zhǔn)品或預(yù)處理樣本 50μL,緊接著加入酶偶聯(lián)物 50μL,封板膜密封。
手動搖勻板面,37℃恒溫孵育 60min。
撕開封板棄液,洗滌液浸泡 30s,拍干,洗板 5 輪。
顯色 A、B 液各 50μL,避光 37℃顯色 15min。
終止液 50μL 快速加入混勻終止。
450nm 波長檢測 OD 值,換算 sp185/HER-2 濃度。
關(guān)鍵字: 人可溶性蛋白185;sp185/HER-2;ELISA試劑盒;
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