本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測原理，在酶標板微孔中固定特異性抗人葡萄球菌蛋白A抗體。加入待測樣本與標準品后，樣本中的葡萄球菌蛋白A抗原與固相抗體發(fā)生特異性免疫結(jié)合，洗除未結(jié)合雜質(zhì)后，加入酶標記特異性抗體形成免疫復(fù)合物，充分反應(yīng)并洗滌干凈后，加入顯色底物發(fā)生酶促顯色反應(yīng)，終止反應(yīng)后通過酶標儀檢測吸光度，根據(jù)標準品濃度與對應(yīng)吸光度繪制標準曲線，即可定量檢測樣本中人葡萄球菌蛋白A的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E794 |
英文名稱 | SPA Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：檢出下限 0.08ng/mL
檢測范圍：0.2ng/mL～12.8ng/mL
反應(yīng)時間：包被板加樣后室溫孵育 70min，二抗 37℃孵育 55min，顯色 20min
保存條件：試劑盒整體 2～8℃避光；剩余試劑分裝凍存 - 20℃可延長保存 3 個月，避免反復(fù)凍融
顯色系統(tǒng)：HRP 催化 TMB 顯色，硫酸終止反應(yīng)變黃
檢測波長：450nm/620nm 雙波長校正讀數(shù)
標準曲線繪制：選用五次多項式擬合曲線匹配標準品梯度 OD 數(shù)據(jù)
注意事項：操作全程避免交叉加樣槍頭混用；終止液具備腐蝕性，禁止徒手直接觸碰
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標物，提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶（HRP）標記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
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實驗操作流程：
全部試劑室溫放置 30min 化開結(jié)晶，稀釋濃縮洗滌液；固定酶標板框架，區(qū)分標準品、待測、空白孔位。
標準品孔加入倍比稀釋 SPA 標準品 50μL，樣本孔上樣稀釋后待測液 50μL，空白孔無添加。
每孔加入一步法 SPA 酶標記檢測抗體 100μL，封板膜嚴實密封板孔。
37℃恒溫培養(yǎng)箱避光孵育 65min，保證抗原抗體充分結(jié)合。
棄液洗板，每孔加滿洗滌液靜置 40s，甩出液體，重復(fù)洗板 5 次，倒置板條在吸水紙上拍干。
每孔等量加入顯色底物 A、B 液各 50μL，避光 37℃顯色 18min。
滴加終止液 50μL 混勻，450nm 波長檢測 OD 值，通過標準曲線計算樣本 SPA 濃度。
關(guān)鍵字： 人葡萄球菌蛋白A;SPA;ELISA試劑盒;
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