本試劑盒依托雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附技術,微孔板固定抗人酪氨酸羥化酶(TH)特異性抗體,待測樣本中的TH抗原與固相抗體特異性結合,洗滌后加入辣根過氧化物酶標記檢測抗體,形成夾心復合物,底物顯色后通過吸光度檢測,定量測定樣本中TH蛋白的濃度。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人酪氨酸羥化酶(TH)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E987 |
英文名稱 | TH Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:檢出下限 0.3 pg/mL
檢測范圍:0.2 pg/mL ~ 12.8 pg/mL
反應時間:孵育 79min,酶標物 43min,顯色 17min
保存條件:2~8℃冷藏,不可凍存微孔板及顯色液
顯色系統(tǒng):TMB 顯色底物體系
檢測波長:450nm/630nm 雙波長校正
標準曲線繪制:X 軸標準品濃度,Y 軸 OD 值,四參數(shù)方程構建標準曲線
注意事項:神經(jīng)組織樣本低溫處理,常溫放置易導致蛋白失活
實驗前準備工作:
1. 試劑平衡與稀釋
試劑盒所有組分(酶標板、標準品、酶結合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液)從 2~8℃取出,室溫(20~25℃)放置平衡 30min,嚴禁直接低溫操作。
濃縮洗滌液配制:按標簽標注比例用去離子純水稀釋(常見 20× 濃縮液:1 份濃縮液 + 19 份純水),混勻備用,現(xiàn)配現(xiàn)用。
標準品復溶 / 梯度稀釋:
凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解,室溫靜置 10min,輕柔吹打混勻;
按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品,單獨標記,剩余原液分裝 - 20℃避光保存,避免反復凍融。
待測樣本預處理:血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋,渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清;溶血、脂血嚴重樣本棄用。
2. 耗材與設備準備
設備:恒溫 37℃孵育箱、酶標儀(450nm 主波長,630nm 參比)、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(或手動洗板槽)、封板膜、離心管。
耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染,移液槍提前校準。
取出本次實驗所需酶標板條,剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋,加干燥劑 2~8℃避光保存。
3. 孔位規(guī)劃標記
酶標板做好分區(qū)標記:空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔(所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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實驗操作流程:
試劑盒室溫平衡 30min,取出酶標板,排布全部實驗孔位。
每孔加入梯度標準品或稀釋待測樣本 50μL,緊接著加入酶工作液 50μL,封板膜密封。
水平晃動酶標板混勻,37℃恒溫孵育 60min。
撕膜倒液,洗滌液注滿微孔浸泡 30s,徹底拍干,洗板 5 輪。
顯色液 A、B 各 50μL,避光顯色 15min。
終止液 50μL 快速加入終止顯色。
酶標儀 450nm 讀數(shù),擬合曲線定量 TH 蛋白濃度。
關鍵字: 人酪氨酸羥化酶;TH;ELISA試劑盒;
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