本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA原理,微孔板預先包被抗人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)單克隆抗體,待測樣本中的mTOR抗原與固相抗體精準結(jié)合,孵育洗滌后加入酶標記多克隆抗體形成免疫夾心復合物,底物顯色終止后檢測吸光度,依據(jù)標準曲線定量檢測mTOR含量。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E3520 |
英文名稱 | mTOR ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度:最低可測 0.16 ng/mL
檢測范圍:0.078 ng/mL ~ 5 ng/mL
反應時間:室溫孵育 83min,二抗 49min,顯色 18min
保存條件:2~8℃避光,底物液避免接觸氧化性試劑
顯色系統(tǒng):單組分 TMB 顯色,稀硫酸終止
檢測波長:450nm
標準曲線繪制:倍比稀釋標準品上機測值,非線性回歸繪制標準曲線
注意事項:樣本分裝凍存,反復凍融超過 3 次結(jié)果嚴重失真
關鍵注意事項:
本試劑盒僅科研體外檢測,嚴禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強光直射,TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用,杜絕交叉污染;所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴格控制 37℃,溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分,殘液會造成非特異性結(jié)合,背景偏高。
終止后需快速讀數(shù),放置過久吸光度會漂移,結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸,避免接觸皮膚、眼睛,若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2~8℃冷鏈,嚴禁高溫暴曬。
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實驗操作流程:
試劑室溫放置 29min,拆分微孔板剩余部分密封冷藏,標記各組實驗孔。
樣本孔與標準孔加入對應液體 50μL,隨即加入酶偶聯(lián)試劑 50μL,封板密閉。
輕搖混勻后 37℃孵育 58min。
去封板膜,洗液浸泡 28s,拍干,洗板 5 次。
顯色 A、B 液各 50μL / 孔,避光顯色 14min。
滴加終止液 50μL 終止反應。
450nm 讀取 OD 值,計算 mTOR 含量。
關鍵字: 人雷帕霉素靶蛋白;mTOR;ELISA試劑盒;
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