本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，酶標(biāo)板微孔固定抗人清道夫受體B(CD36)特異性抗體。待測(cè)樣本中的SRB/CD36抗原與固相抗體特異性結(jié)合，孵育洗滌后加入HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體，形成完整的夾心免疫復(fù)合物，經(jīng)底物酶促顯色、終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出樣本中清道夫受體B的濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人清道夫受體B(SRB/CD36)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E2973 |
英文名稱(chēng) | SRB ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢出 0.082ng/mL
檢測(cè)范圍：0.26ng/mL～16.64ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：樣本孵育 57min，二抗反應(yīng) 45min，顯色 15.5min
保存條件：2～8℃豎直冷藏，洗滌液濃縮液出現(xiàn)結(jié)晶 37℃水浴融化即可
顯色系統(tǒng)：臨用配制雙組份 TMB 顯色液
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm+650nm 雙波長(zhǎng)校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：五點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)梯度，四參數(shù)非線性擬合
注意事項(xiàng)：高脂血清需稀釋后檢測(cè)，脂蛋白會(huì)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合抗體降低顯色信號(hào)
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：
1. 試劑平衡與稀釋
試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。
濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋?zhuān)ǔＲ?jiàn) 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。
標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋?zhuān)?/span>
凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；
按說(shuō)明書(shū)梯度倍比稀釋出 5~7 個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
待測(cè)樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋?zhuān)瑴啙針颖?12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。
2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備
設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長(zhǎng)，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動(dòng)洗板槽）、封板膜、離心管。
耗材無(wú)核酸酶、無(wú)熱源、無(wú)蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。
取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。
3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記
酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑室溫放置 30min，稀釋濃縮洗滌緩沖液；取出包被板條劃分孔位類(lèi)型。
梯度 SRB/CD36 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL 加入標(biāo)準(zhǔn)品孔，稀釋待測(cè)樣本 50μL 加入樣本孔，空白孔留空。
各檢測(cè)孔加入一步法酶標(biāo)記一抗工作液 100μL，封板膜嚴(yán)實(shí)封口。
37℃避光孵育 60min，避免強(qiáng)光照射酶標(biāo)板。
洗板 5 次，每次洗滌液浸泡 30s，甩出液體后反復(fù)拍干板條。
每孔添加顯色 A 液、B 液各 50μL，避光 37℃顯色 15min。
終止液終止顯色反應(yīng)，450nm 測(cè) OD 值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 SRB/CD36 含量。
關(guān)鍵字： 人清道夫受體B;SRB/CD36;ELISA試劑盒;
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