本試劑盒運用雙抗體夾心ELISA檢測原理，酶標板微孔包被抗人溶酶體相關(guān)膜蛋白2特異性抗體。樣本中的HLAMP-2抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除游離組分后，加入辣根過氧化物酶標記二抗孵育結(jié)合，形成穩(wěn)定免疫復合物，經(jīng)顯色反應、終止反應后檢測吸光度，結(jié)合標準曲線完成樣本中靶蛋白的定量檢測。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最小檢出 0.076ng/mL

檢測范圍：0.24ng/mL～15.36ng/mL

反應時間：室溫孵育 60min，37℃二抗 51min，顯色 17min

保存條件：試劑盒豎直放置 2～8℃避光，禁止倒置導致試劑滲漏

顯色系統(tǒng)：A、B 液 1:1 配比混合顯色

檢測波長：450nm+650nm 雙波長校正

標準曲線繪制：最小二乘法線性回歸構(gòu)建曲線

注意事項：細胞上清樣本需去除細胞沉淀，溶酶體破裂碎片會干擾孔內(nèi)結(jié)合反應
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復凍融≥3 次會導致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結(jié)合效率，背景升高、重復性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導致試劑盒完全失效。

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

全部試劑室溫放置 30min，配制洗滌工作液；組裝酶標板并標注各類孔位。

標準品孔上樣倍比稀釋 HLAMP-2 標準品 50μL，樣本孔加入稀釋待測樣品 50μL，空白孔不加試劑。

每孔加入一步法酶結(jié)合一抗工作液 100μL，封板嚴實封口。

37℃避光孵育 72min，延長孵育提升大分子蛋白結(jié)合效果。

洗板 5 次，每次洗滌液浸泡 40s，反復洗滌去除非特異性結(jié)合雜質(zhì)，拍干板條。

依次添加顯色底物 A、B 各 50μL，避光 37℃顯色 18min。

加入終止液終止顯色，450nm 檢測吸光度，擬合曲線計算 HLAMP-2 濃度。