本試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)原理，將純化的人乳鐵蛋白抗原包被于酶標(biāo)板微孔。檢測(cè)過程中，樣本中的乳鐵蛋白IgG抗體與固相抗原特異性結(jié)合，孵育洗滌后加入酶標(biāo)記抗人IgG二抗，再次洗滌后進(jìn)行底物顯色，終止反應(yīng)后測(cè)定吸光度，吸光度數(shù)值與樣本中靶抗體含量成正比，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig)ELISA試劑 | 貨號(hào) | Y-E518 |
英文名稱 | LF/LTF Ab-IgG Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：檢出限 0.045AU/mL
檢測(cè)范圍：0.13AU/mL～8.32AU/mL
反應(yīng)時(shí)間：抗原結(jié)合孵育 49min，酶標(biāo)抗人 IgG 孵育 45min，顯色 15min
保存條件：試劑盒 2～8℃避光密封，開封后 30 天內(nèi)用完剩余試劑
顯色系統(tǒng)：臨用新配雙組份 TMB 顯色液
檢測(cè)波長(zhǎng)：僅 450nm 波長(zhǎng)讀取吸光度
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：濃度取對(duì)數(shù)后線性回歸繪制定量曲線
注意事項(xiàng)：乳汁樣本需離心去除脂肪層，脂類包裹抗原會(huì)降低抗體結(jié)合效率
儲(chǔ)存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒組分室溫平衡 32min，配比稀釋洗滌液；固定酶標(biāo)板框架區(qū)分孔位類型。
標(biāo)準(zhǔn)品孔加入梯度稀釋 LF 抗體 IgG 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，樣本孔加入稀釋待測(cè)樣本 50μL，空白孔空置。
非空白孔加入一步法酶標(biāo)二抗工作液 100μL，密封封板膜。
37℃避光孵育 66min，避光孵育避免底物提前氧化。
洗板 4 次，每次洗滌液浸泡 36s，甩干廢液后吸水紙拍凈殘液。
每孔添加顯色底物 A、B 各 50μL，避光 37℃顯色 16min。
加入終止液終止反應(yīng)，酶標(biāo)儀 450nm 讀數(shù)，計(jì)算乳鐵蛋白 IgG 抗體滴度。
關(guān)鍵字： 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG;LF/LTF Ab-Ig;ELISA試劑盒;
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