本試劑盒運(yùn)用雙抗體夾心ELISA檢測原理，酶標(biāo)板微孔包被抗人色氨酰tRNA合成酶特異性抗體。樣本中的WARS蛋白與固相抗體特異性結(jié)合，孵育洗滌后加入HRP標(biāo)記檢測抗體，形成完整的免疫夾心復(fù)合物，經(jīng)底物酶促顯色、終止反應(yīng)后檢測吸光度，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線可精準(zhǔn)測定樣本中WARS蛋白的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人色氨酰tRNA合成酶(WARS)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E903 |
英文名稱 | WARS Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低可測 0.071ng/mL
檢測范圍：0.22ng/mL～14.08ng/mL
反應(yīng)時間：37℃夾心結(jié)合 58min，酶結(jié)合物 49min，顯色 16.2min
保存條件：試劑盒 2～8℃防潮，干粉標(biāo)準(zhǔn)品溶解后僅限單次實(shí)驗(yàn)使用
顯色系統(tǒng)：臨用配制雙組份 TMB 顯色液
檢測波長：450nm+630nm 雙波長校正
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：一元線性回歸繪制標(biāo)準(zhǔn)定量曲線
注意事項(xiàng)：樣本避免 RNase 污染，tRNA 結(jié)合型 WARS 易被核酸酶解離導(dǎo)致數(shù)值偏低
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實(shí)驗(yàn)廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運(yùn)輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒組分室溫回溫 30min，配比稀釋洗滌緩沖液；按需拆板標(biāo)記標(biāo)準(zhǔn)、樣本、空白孔。
標(biāo)準(zhǔn)品孔添加梯度稀釋 WARS 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，樣本孔加入預(yù)處理待測樣本 50μL，空白孔留空不加樣。
非空白孔加入一步法酶結(jié)合一抗工作液 100μL，封板膜密封封口。
37℃避光孵育 65min，規(guī)避環(huán)境溫度波動。
洗板 5 次，每次洗滌液浸泡 34s，甩出廢液后徹底拍干孔內(nèi)液體。
每孔加入顯色 A 液、B 液各 50μL，避光 37℃顯色 15min。
滴加終止液終止反應(yīng)，15min 內(nèi) 450nm 讀取 OD 值，計(jì)算 WARS 蛋白含量。
關(guān)鍵字： 人色氨酰tRNA合成酶;WARS;ELISA試劑盒;
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