本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，微孔板包被PLSCR1特異性單克隆抗體，樣本中的人磷脂爬行酶1與固相抗體特異性結(jié)合，結(jié)合酶標(biāo)檢測(cè)抗體后形成穩(wěn)定免疫夾心復(fù)合物，經(jīng)顯色反應(yīng)及吸光度檢測(cè)，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線可精準(zhǔn)定量樣本中PLSCR1蛋白的表達(dá)含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人磷脂爬行酶1(PLSCR1)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E897 |
英文名稱 | PLSCR1 Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：LOD≤0.04ng/mL
檢測(cè)范圍：0.14ng/mL–7ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：分步加樣孵育合計(jì) 155min
保存條件：試劑盒 2~8℃，微孔板條密封防潮冷藏
顯色系統(tǒng)：改良 TMB 顯色體系
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：6 梯度稀釋標(biāo)準(zhǔn)品，線性回歸生成曲線
注意事項(xiàng)：細(xì)胞膜蛋白提取上清避免脂質(zhì)雜質(zhì)干擾洗板效果
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：
1. 試劑平衡與稀釋
試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。
濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。
標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋：
凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；
按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
待測(cè)樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。
2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備
設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長(zhǎng)，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動(dòng)洗板槽）、封板膜、離心管。
耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。
取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。
3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記
酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
樣本前處理：細(xì)胞膜裂解上清高速離心取澄清液體，稀釋混勻；
微孔加樣：酶標(biāo)板各孔加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)裂解樣本 100μL；
同步免疫孵育：直接加入酶標(biāo)記抗體，覆膜 37℃孵育 65min；
洗滌微孔：棄液后洗滌液浸泡 29s，拍干，洗板 4 次；
避光顯色：加入顯色 A、B 液反應(yīng) 15min；
終止操作：加入終止液混勻板面；
結(jié)果分析：酶標(biāo)儀測(cè)吸光度，標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 PLSCR1 含量。
關(guān)鍵字： 人磷脂爬行酶1;PLSCR1;ELISA試劑盒;
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