本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理，微孔板固相包被人絲狀血球凝集素(FHA)特異性抗體，待測樣本與標(biāo)準(zhǔn)品中的FHA抗原與固相抗體特異性結(jié)合，孵育洗滌后加入酶標(biāo)記配對(duì)抗體，形成穩(wěn)定免疫復(fù)合物，經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后檢測吸光度，數(shù)值大小對(duì)應(yīng)樣本中FHA的濃度水平，可完成定量檢測。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：人絲狀血球凝集素(FHA)ELISA試劑盒

英文名稱：FHA ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E2979

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢出 8.5pg/mL

檢測范圍：50pg/mL ~ 2400pg/mL

反應(yīng)時(shí)間：37℃孵育 105min，酶二抗 72min，底物顯色 30min，總時(shí)長 3h27min

保存條件：試劑盒 2~8℃避光，屬于病原抗原檢測試劑，需單獨(dú)冷藏不可與普通試劑混放

顯色系統(tǒng)：即用型 TMB 顯色底物，酸性終止液終止變色

檢測波長：450nm 搭配 620nm 雙波長讀數(shù)

標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：百日咳桿菌 FHA 標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋，線性回歸繪制曲線，6 個(gè)梯度點(diǎn)

注意事項(xiàng)：呼吸道分泌物樣本需除菌預(yù)處理；操作嚴(yán)格遵循微生物實(shí)驗(yàn)生物安全規(guī)范
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋：

凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

待測樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。

2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備

設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動(dòng)洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。

取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記

酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。
實(shí)驗(yàn)步驟如下：

試劑盒所有組分室溫平衡 28min，稀釋洗滌緩沖液，逐級(jí)配制 FHA 標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋液，標(biāo)記孔位。

標(biāo)準(zhǔn)品孔加 50μL 不同濃度 FHA 標(biāo)準(zhǔn)溶液；待測孔加 46μL 稀釋液 + 14μL 待測樣本；空白孔不加試劑。

除空白孔外每孔加入 HRP 標(biāo)記特異性抗體 100μL，封板 37℃孵育 70min。

棄液洗板，洗滌液注滿每孔靜置 39s，甩干循環(huán) 6 次，徹底拍干微孔板。

每孔加入顯色底物雙液各 50μL，輕震混勻，避光顯色 18min。

加入終止液 50μL 混勻終止酶促顯色。

450nm 讀取 OD 值，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 FHA 濃度。
公司正在出售的產(chǎn)品：