本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測原理,固相微孔板包被人酸性磷酸酶(ACP)特異性抗體,樣本與標準品中的ACP抗原與固相抗體特異性免疫結合,洗滌純化體系后加入酶標記二抗,構建穩(wěn)定的免疫夾心復合物,經酶促顯色、終止反應后檢測吸光度,數值與樣本中ACP濃度成正比,結合標準曲線完成定量檢測。
基本參數?:

產品名稱:人酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒
英文名稱:ACP Elisa Kit
貨號:Y-E997
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最小檢出 0.03U/L
檢測范圍:0.15U/L ~ 18U/L
反應時間:樣本孵育 70min,酶結合物 51min,底物顯色 17min,總時長 2h18min
保存條件:試劑盒主體 2~8℃避光,包被板嚴禁冷凍,洗滌液室溫儲存
顯色系統:單組分 TMB 顯色液,強酸終止液終止
檢測波長:僅 450nm 波長檢測
標準曲線繪制:活性單位梯度稀釋,四參數擬合曲線,8 個梯度點
注意事項:前列腺組織樣本 ACP 活性偏高;樣本不可反復凍融,酶蛋白易失活
試劑盒組成:

預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原,結合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線,定量檢測依據
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結合目標物,提供酶結合位點
辣根過氧化物酶(HRP)標記親和素 1瓶 與生物素結合,催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物,產生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應,穩(wěn)定顯色結果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板,去除未結合物質
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實驗步驟如下:

試劑盒組分室溫回溫 30min,稀釋濃縮洗滌液,梯度稀釋 ACP 標準品,區(qū)分空白、標品、樣本三類孔。
標準品孔加入 50μL 梯度 ACP 標準液;樣本孔加 50μL 稀釋液 + 10μL 樣本;空白孔無加樣。
檢測孔加入酶標記抗 ACP 抗體 100μL,封板 37℃孵育 62min。
棄液后洗滌液加滿每孔靜置 30s,甩干洗板 5 次,微孔板拍干。
顯色雙液各 50μL 混勻添加,避光顯色 16min。
加入終止液 50μL 終止并混勻顯色。
450nm 測 OD 值,標準曲線計算 ACP 酶活力對應濃度。
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關鍵字: 人酸性磷酸酶;ACP;ELISA試劑盒;
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