本試劑盒采用競爭法酶聯(lián)免疫吸附原理，微孔板固相包被他克莫司(FK506)抗原，待測樣本中的FK506與固相抗原競爭結(jié)合體系中的酶標(biāo)記特異性抗體，孵育洗滌后去除未結(jié)合物質(zhì)，加入底物顯色，樣本中FK506含量越高，競爭結(jié)合的酶標(biāo)抗體越少，顯色吸光度值越低，通過標(biāo)準(zhǔn)競爭曲線可精準(zhǔn)定量樣本中FK506的藥物濃度。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人他克莫司(FK506)ELISA試劑盒
英文名稱：FK506 ELISA Kit
貨號：Y-E2678
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：血藥最低檢出 0.2ng/mL
檢測范圍：0.5ng/mL ~ 45ng/mL
反應(yīng)時間：樣本孵育 120min，競爭結(jié)合二抗 75min，避光顯色 26min，總時長 3h41min
保存條件：試劑盒 2~8℃避光冷藏，屬于治療藥物監(jiān)測試劑盒，標(biāo)準(zhǔn)品密封低溫保存
顯色系統(tǒng)：A+B 混合顯色，酸性終止液終止
檢測波長：450nm 單波長測定 OD 值
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：競爭法五參數(shù)擬合，8 個血藥濃度梯度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
注意事項：全血樣本需抗凝后提取檢測；服藥間隔固定時間采血，保證監(jiān)測結(jié)果可比
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實驗步驟如下：
試劑盒室溫復(fù)溫 29min，稀釋濃縮洗滌液，梯度稀釋 FK506 校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品，拆分未使用板條冷藏。
校準(zhǔn)孔加入 50μL 梯度校準(zhǔn)液；待測樣本孔加 47μL 稀釋液 + 13μL 全血待測樣本；空白孔無加樣。
檢測孔加入酶標(biāo)記 FK506 競爭抗原工作液 100μL，封板 37℃孵育 66min。
棄去孔內(nèi)廢液，洗滌液浸泡每孔 37s 甩干，重復(fù)洗板 5 次，板條徹底拍干。
顯色 A、B 液各 50μL 混勻加入每孔，37℃避光顯色 17min。
加入終止液 50μL 混勻終止酶促顯色。
酶標(biāo)儀 450nm 測定 OD 值，反向標(biāo)準(zhǔn)曲線計算血藥 FK506 濃度。
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關(guān)鍵字： 人他克莫司;FK506;ELISA試劑盒;
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