本試劑盒基于經(jīng)典雙抗體夾心ELISA技術(shù)原理,酶標板微孔固相化抗人Gp49a單克隆抗體,加入標準品與待測樣本后,樣本內(nèi)Gp49a抗原與固相抗體特異性結(jié)合,洗板去除游離雜質(zhì),加入HRP標記的Gp49a二抗形成免疫復(fù)合物,充分反應(yīng)后洗去未結(jié)合酶標抗體,加入底物顯色,酶促反應(yīng)產(chǎn)生的顏色深淺與樣本中Gp49a含量正相關(guān),檢測吸光度并結(jié)合標準曲線,可定量檢測樣本中人糖蛋白49A的濃度。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒
英文名稱:Gp49a Elisa Kit
貨號:Y-E633
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最低檢測濃度 0.06ng/mL
檢測范圍:0.12~9.5ng/mL
反應(yīng)時間:室溫孵育樣本 80min,酶標抗體 55min,避光顯色 16min
保存條件:試劑盒整體 2~8℃避光,洗滌濃縮液可室溫短期存放 1 個月
顯色系統(tǒng):單瓶裝即用型 TMB 顯色試劑
檢測波長:主波長 450nm,參比 650nm
標準曲線繪制:去掉最高、最低濃度異常點后,四參數(shù)擬合建模
注意事項:加樣槍頭一孔一換,杜絕孔間交叉污染
關(guān)鍵注意事項:

實驗前需仔細閱讀對應(yīng)試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
實驗步驟如下:

試劑盒全部試劑室溫平衡 30min,取出預(yù)包被 Gp49a 抗體板,棄液洗板 2 次,倒扣拍干微孔內(nèi)液體。
規(guī)劃孔位:空白對照孔、梯度標準品孔、待測樣本孔;標準品孔加對應(yīng)濃度 Gp49a 標準品 50μL,樣本孔加稀釋待測樣本 50μL,空白孔補稀釋液。
所有孔加入 HRP 標記抗體工作液 50μL,密封封板,37℃孵育 60min。
倒掉孔內(nèi)液體,洗板液注孔浸泡 30s 棄液,重復(fù)洗板 5 次,徹底拍干。
依次添加顯色 A、B 液各 50μL,避光 37℃顯色 14min。
每孔加入終止液 50μL 混勻終止顯色。
酶標儀 450nm 檢測 OD 值,通過標準曲線計算樣本 Gp49a 濃度。
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關(guān)鍵字: 人糖蛋白49A;Gp49a;ELISA試劑盒;
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