本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA檢測原理，固相酶標(biāo)板包被抗人DNase-Ⅰ特異性抗體，可特異性捕獲樣本中的脫氧核糖核酸酶Ⅰ，孵育結(jié)合后洗板去除游離雜質(zhì)，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記二抗形成免疫夾心復(fù)合物，充分反應(yīng)后洗去未結(jié)合抗體，加入顯色底物發(fā)生酶促反應(yīng)，終止顯色后檢測吸光度，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線精準(zhǔn)測定樣本中DNase-Ⅰ的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA試劑盒
英文名稱：DNase-Ⅰ Elisa Kit
貨號：Y-E3053
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：檢出下限 0.08ng/mL
檢測范圍：0.16～13ng/mL
反應(yīng)時間：37℃孵育 75min，二抗 46min，避光顯色 14min
保存條件：所有試劑 2～8℃避光，底物液禁止長時間暴露光源
顯色系統(tǒng)：即用型 TMB 顯色試劑
檢測波長：450nm 單波長檢測
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：7 個梯度濃度構(gòu)建曲線，R2 閾值 0.994
注意事項：核酸污染環(huán)境會造成本底偏高，操作臺提前擦拭除酶
關(guān)鍵注意事項：
本試劑盒僅科研體外檢測，嚴(yán)禁臨床診斷使用。
全程避免試劑、板條強(qiáng)光直射，TMB 見光易失效。
移液器吸頭一次性使用，杜絕交叉污染；所有操作無酶、無熱源。
孵育溫度嚴(yán)格控制 37℃，溫度偏低會降低 OD 值、靈敏度下降。
洗板必須充分，殘液會造成非特異性結(jié)合，背景偏高。
終止后需快速讀數(shù)，放置過久吸光度會漂移，結(jié)果失真。
終止液含稀硫酸，避免接觸皮膚、眼睛，若不慎接觸大量清水沖洗。
實驗廢棄物按生物安全廢棄物規(guī)范處理。
不同批次試劑盒組分不可混用。
試劑盒運輸全程 2～8℃冷鏈，嚴(yán)禁高溫暴曬。
實驗步驟如下：
試劑盒室溫平衡 26min，DNase-Ⅰ 包被板棄孔內(nèi)保存液，洗滌液洗板 2 遍，拍干微孔殘留液體。
劃分孔位：空白孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)孔、細(xì)胞裂解樣本孔；標(biāo)準(zhǔn)品孔加入 DNase-Ⅰ 標(biāo)準(zhǔn)品 55μL，樣本孔加入稀釋裂解液 55μL，空白孔補(bǔ)稀釋液。
每孔加入酶標(biāo)記檢測抗體 55μL，封板，37℃孵育 63min。
棄液洗板，每孔加滿洗滌液靜置 30s 倒掉，重復(fù)洗板 5 次，充分拍干微孔。
依次加入顯色 A 液、B 液各 50μL，遮光 37℃顯色 17min。
滴加終止液 50μL，輕微晃動酶標(biāo)板終止反應(yīng)。
酶標(biāo)儀 450nm 檢測吸光度，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線定量 DNase-Ⅰ 濃度。
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關(guān)鍵字： 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ;DNase-Ⅰ;ELISA試劑盒;
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