本試劑盒運(yùn)用雙抗體夾心ELISA免疫檢測(cè)原理，將人RAGE/AGER特異性抗體包被于酶標(biāo)板表面，待測(cè)樣本中的晚期糖基化終末產(chǎn)物受體與固相抗體特異性結(jié)合，孵育洗板后加入HRP標(biāo)記二抗形成穩(wěn)定免疫復(fù)合物，洗除游離標(biāo)記抗體后加入底物顯色，終止反應(yīng)后檢測(cè)吸光度，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線即可精準(zhǔn)定量樣本中RAGE/AGER的表達(dá)水平。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA試劑盒
英文名稱：RAGE/AGER ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E2909
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢出 0.04ng/mL
檢測(cè)范圍：0.08～8.2ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：封閉 30min，樣本 37℃孵育 105min，二抗 62min，顯色 15min
保存條件：板條密封 2～8℃，其余試劑同環(huán)境避光保存
顯色系統(tǒng)：A 液底物 + B 液氧化劑雙組分顯色
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm 讀數(shù)，620nm 扣除孔底背景
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：四參數(shù)擬合，自動(dòng)校正空白孔基線
注意事項(xiàng)：血清樣本不可反復(fù)凍融超過 2 次，受體蛋白易降解
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒全部組分室溫平衡 33min，RAGE 包被微孔板棄保護(hù)液，洗板 2 次后拍干微孔水分。
設(shè)置空白對(duì)照、梯度標(biāo)準(zhǔn)品、組織蛋白樣本孔；標(biāo)準(zhǔn)品孔加入 RAGE 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，樣本孔加入稀釋蛋白樣本 50μL，空白孔補(bǔ)稀釋緩沖液。
每孔加入酶標(biāo)二抗 50μL，密封封板膜，37℃孵育 60min。
去封板傾倒廢液，洗板液注滿每孔靜置 30s 丟棄，洗板 5 次，充分拍干。
每孔添加顯色 A、B 液各 50μL，避光 37℃顯色 16min。
每孔加注終止液 50μL，輕搖混勻終止酶反應(yīng)。
450nm 酶標(biāo)儀測(cè)吸光度，定量受體蛋白表達(dá)量。
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關(guān)鍵字： 人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體;RAGE/AGER;ELISA試劑盒;
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