本試劑盒采用間接ELISA檢測(cè)原理，微孔板包被卵清蛋白特異性抗原，樣本中的人卵清蛋白特異性IgG抗體與固相抗原特異性結(jié)合，洗板后加入酶標(biāo)記抗人IgG抗體，催化底物顯色，顯色強(qiáng)度與OVA sIgG含量成正比，可定量檢測(cè)樣本中特異性抗體水平。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E397 |
英文名稱(chēng) | OVA sIgG Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢出抗體濃度≤0.1AU/mL
檢測(cè)范圍：0.3AU/mL–100AU/mL
反應(yīng)時(shí)間：室溫避光反應(yīng) 118min
保存條件：2～8℃冷藏，包被板防受潮脫落包被抗原
顯色系統(tǒng)：TMB 雙組分顯色
檢測(cè)波長(zhǎng)：450/630nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：校準(zhǔn)品梯度稀釋四參數(shù)擬合定量曲線
注意事項(xiàng)：雞蛋過(guò)敏患者血清建議新鮮檢測(cè)，長(zhǎng)期存放抗體效價(jià)下降
通用注意事項(xiàng)：
樣本要求
血清、血漿避免嚴(yán)重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復(fù)凍融≥3 次會(huì)導(dǎo)致抗原降解，檢測(cè)值偏低。
溫度控制
孵育溫度嚴(yán)格 37℃，溫箱溫度波動(dòng)、室溫過(guò)低會(huì)降低結(jié)合效率，背景升高、重復(fù)性變差。
避光操作
TMB 底物、酶結(jié)合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類(lèi)靶標(biāo)樣本見(jiàn)光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。
洗板規(guī)范
洗滌不充分會(huì)造成高背景、假陽(yáng)性；拍干時(shí)使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。
污染防控
實(shí)驗(yàn)耗材無(wú) DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標(biāo)準(zhǔn)品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。
安全防護(hù)
終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實(shí)驗(yàn)廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。
失效判定
試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標(biāo)準(zhǔn)品梯度無(wú)明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。
稀釋校正
樣本 OD 值高于最高標(biāo)準(zhǔn)孔時(shí)，必須稀釋重測(cè)，最終結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測(cè)限標(biāo)注 “低于試劑盒靈敏度”。
空白對(duì)照
空白孔吸光度應(yīng)極低，若空白孔 OD＞0.1，說(shuō)明洗滌不充分或試劑污染，實(shí)驗(yàn)作廢重做。
儲(chǔ)存禁忌
試劑盒不可冷凍結(jié)冰，冷凍會(huì)造成酶標(biāo)抗體蛋白變性，直接導(dǎo)致試劑盒完全失效。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
樣本稀釋?zhuān)貉鍢颖?/span> 1:10 稀釋?zhuān)浞诸嵉够靹颍?/span>
微孔加樣：酶標(biāo)板加入陰陽(yáng)性對(duì)照、待測(cè)稀釋血清 100μL；
一步免疫孵育：直接加入酶標(biāo)記二抗，封板 37℃孵育 69min；
洗板流程：棄液后洗滌液浸泡 32s，拍干，洗板 5 次；
顯色孵育：避光加入顯色液 15min；
終止混勻：滴加終止液輕搖酶標(biāo)板；
結(jié)果判定：酶標(biāo)儀讀數(shù)判定 OVA 特異性 IgG 抗體水平。
關(guān)鍵字： 人卵清蛋白特異性IgG;OVA sIgG;ELISA試劑盒;
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