本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA檢測(cè)技術(shù),酶標(biāo)板預(yù)先包被人ACO-2特異性抗體,樣本中的烏頭酸酶2與固相抗體特異性結(jié)合,孵育完成抗原抗體反應(yīng)后洗除游離組分,加入HRP標(biāo)記二抗構(gòu)建免疫復(fù)合物,再次洗板純化體系后加入底物顯色,顯色強(qiáng)度與ACO-2含量成正比,通過吸光度檢測(cè)和標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)定量。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:人烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA試劑盒
英文名稱:ACO-2 Elisa Kit
貨號(hào):Y-E3043
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:≤0.08U/L
檢測(cè)范圍:0.16~42U/L
反應(yīng)時(shí)間:37℃孵育 70min,二抗 42min,顯色 15min
保存條件:所有試劑 2~8℃避光,終止液常溫密封儲(chǔ)存
顯色系統(tǒng):單瓶裝 TMB 顯色液,硫酸終止
檢測(cè)波長:450nm 單波長測(cè)定吸光度
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:線性擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線,直接換算酶活力單位
注意事項(xiàng):樣本避免金屬離子污染,鐵離子會(huì)干擾烏頭酸酶活性檢測(cè)
關(guān)鍵注意事項(xiàng):

實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說明書,不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存,未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度(通常2-8℃或-20℃)
避免試劑污染,不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋,防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光,避免陽光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下:

試劑盒室溫放置 32min,ACO-2 抗體包被板棄孔內(nèi)液體,洗滌液洗板 1 次后倒扣拍干微孔。
區(qū)分空白對(duì)照、倍比標(biāo)準(zhǔn)品、線粒體提取樣本孔;標(biāo)準(zhǔn)品孔加入 ACO-2 標(biāo)準(zhǔn)品 60μL,樣本孔加入稀釋線粒體上清 60μL,空白孔補(bǔ)稀釋液。
每孔加入酶結(jié)合抗體 60μL,封板密封,37℃濕盒孵育 70min。
掀開封板膜傾倒廢液,洗滌液浸泡每孔 35s 棄液,洗板 5 次,用力拍干微孔水分。
配制顯色工作液每孔加 100μL,室溫避光顯色 12min。
每孔加注終止液 50μL 混勻終止底物反應(yīng)。
450nm 酶標(biāo)儀讀數(shù),擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定 ACO-2 含量。
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關(guān)鍵字: 人烏頭酸酶2;ACO-2;ELISA試劑盒;
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