本試劑盒采用抗體捕獲法ELISA檢測(cè)原理，微孔板固定抗人IgM抗體，特異性捕獲樣本中的人麻疹病毒IgM抗體，隨后加入麻疹病毒抗原和酶標(biāo)抗體構(gòu)建免疫復(fù)合物，經(jīng)顯色反應(yīng)后，通過(guò)吸光度檢測(cè)結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)樣本中MV IgM抗體含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人麻疹病毒IgM(MV IgM)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E612 |
英文名稱 | MV IgM Elisa Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：急性期 IgM 陽(yáng)性符合率＞99%
檢測(cè)范圍：抗體滴度 1:32~1:4096
反應(yīng)時(shí)間：室溫避光孵育合計(jì) 108min
保存條件：2~8℃避光，洗滌液稀釋用水必須為無(wú)熱源純水
顯色系統(tǒng)：TMB 雙組分混合顯色
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm，參比 620nm
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：定值陽(yáng)性對(duì)照血清構(gòu)建定量參考曲線
注意事項(xiàng)：類風(fēng)濕因子干擾易造成假陽(yáng)性，必要時(shí)使用吸附劑預(yù)處理樣本
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作：
1. 試劑平衡與稀釋
試劑盒所有組分（酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶結(jié)合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴(yán)禁直接低溫操作。
濃縮洗滌液配制：按標(biāo)簽標(biāo)注比例用去離子純水稀釋（常見(jiàn) 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。
標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶 / 梯度稀釋：
凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入配套標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；
按說(shuō)明書(shū)梯度倍比稀釋出 5~7 個(gè)濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)品，單獨(dú)標(biāo)記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
待測(cè)樣本預(yù)處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清用樣本稀釋液適當(dāng)稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴(yán)重樣本棄用。
2. 耗材與設(shè)備準(zhǔn)備
設(shè)備：恒溫 37℃孵育箱、酶標(biāo)儀（450nm 主波長(zhǎng)，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機(jī)（或手動(dòng)洗板槽）、封板膜、離心管。
耗材無(wú)核酸酶、無(wú)熱源、無(wú)蛋白污染，移液槍提前校準(zhǔn)。
取出本次實(shí)驗(yàn)所需酶標(biāo)板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。
3. 孔位規(guī)劃標(biāo)記
酶標(biāo)板做好分區(qū)標(biāo)記：空白孔、零標(biāo)準(zhǔn)孔、梯度標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣本孔、復(fù)孔（所有樣本、標(biāo)準(zhǔn)品建議設(shè)置雙復(fù)孔降低誤差）。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
樣本稀釋：血清樣本稀釋后顛倒試管 5 次混勻；
微孔加樣：每孔加入陰陽(yáng)性對(duì)照、待測(cè)稀釋血清 100μL；
一步免疫結(jié)合：直接加入酶標(biāo)記二抗，封板 37℃孵育 68min；
洗板除雜：洗滌液浸泡 31s，拍干，洗板 5 次；
避光顯色：加入 TMB 顯色液 17min；
終止操作：滴加終止液終止反應(yīng)；
檢測(cè)判定：酶標(biāo)儀對(duì)照 cutoff 值判定麻疹 IgM 抗體陰陽(yáng)性。
關(guān)鍵字： 人麻疹病毒IgM;MV IgM;ELISA試劑盒;
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