本試劑盒依托雙抗體夾心ELISA原理，固相酶標(biāo)板包被人CK-20特異性抗體，可特異性捕獲待測(cè)樣本中的細(xì)胞角蛋白20抗原，孵育結(jié)合后洗除體系雜質(zhì)，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記配對(duì)二抗形成免疫復(fù)合物，充分反應(yīng)洗板后加入底物顯色，終止顯色后檢測(cè)吸光度，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線精準(zhǔn)測(cè)定樣本中CK-20的表達(dá)含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：人細(xì)胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒
英文名稱：CK-20 Elisa Kit
貨號(hào)：Y-E276
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：檢出下限 0.085ng/mL
檢測(cè)范圍：0.16～11.3ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：37℃孵育 85min，酶標(biāo)二抗 58min，避光顯色 21min
保存條件：整套試劑 2～8℃，濃縮洗滌液可室溫儲(chǔ)存 60 天
顯色系統(tǒng)：A 液基質(zhì) + B 液氧化劑雙組分分步混合顯色
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm+630nm 雙波長(zhǎng)扣除孔間差異
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：7 梯度標(biāo)品擬合，采用加權(quán)四參數(shù)法繪制曲線
注意事項(xiàng)：避免移液器槍頭交叉使用，防止孔間樣本交叉污染
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說明書，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽性結(jié)果
顯色過程需避光，避免陽光直射影響結(jié)果
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
試劑盒全部試劑室溫平衡 35min，CK-20 特異性包被板棄保護(hù)液，洗滌緩沖液洗板 2 次，倒扣拍干微孔。
劃分孔位：空白對(duì)照孔、系列梯度標(biāo)準(zhǔn)孔、腹水稀釋待測(cè)樣本孔；標(biāo)準(zhǔn)品孔加入梯度 CK-20 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，樣本孔加入稀釋腹水樣本 50μL，空白孔補(bǔ)稀釋液。
每孔加入 HRP 標(biāo)記檢測(cè)抗體 50μL，封板密封，37℃孵育 69min。
傾倒孔內(nèi)廢液，洗滌液加滿每孔靜置 40s 丟棄，洗板 6 次，倒置拍干微孔殘留洗液。
依次添加顯色 A 液、B 液各 50μL，遮光室溫顯色 19min。
滴加終止液 50μL，輕搖酶標(biāo)板終止顯色。
酶標(biāo)儀 450nm 讀取 OD 值，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 CK-20 蛋白濃度。
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關(guān)鍵字： 人細(xì)胞角蛋白20;CK-20;ELISA試劑盒;
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