本試劑盒基于固相雙抗體夾心酶免疫分析原理，以包被于微孔板的抗人MEPE特異性抗體為固相捕獲抗體，結合樣本及標準品中的MEPE抗原，孵育完成特異性抗原抗體結合反應，洗滌去除未結合的雜蛋白、游離成分后，加入HRP標記的MEPE檢測抗體，形成穩(wěn)定夾心免疫復合物，底物顯色體系在酶的催化下產生藍色產物，終止后轉為黃色，吸光度數值與樣本中MEPE含量呈正相關，通過標準曲線即可定量檢測樣本中MEPE濃度。
基本參數?：

產品名稱：人細胞外基質磷酸糖蛋白(MEPE)ELISA試劑盒

英文名稱：MEPE ELISA Kit
貨號：Y-E3511

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢出 0.05ng/mL

檢測范圍：0.1-6.4ng/mL

反應時間：37℃樣本孵育 75min，酶標抗體 55min，顯色 10min

保存條件：全套試劑 2～8℃避光保存，濃縮洗滌液常溫短期放置不失效

顯色系統(tǒng)：改良型 TMB 顯色底物，終止后顏色穩(wěn)定 30min

檢測波長：450nm 單波長檢測

標準曲線繪制：線性擬合曲線，R2 需大于 0.99 方可判定試劑盒有效

注意事項：骨組織來源樣本含鈣離子會干擾結合反應，樣本需離心去除鈣化沉淀后再稀釋上樣
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現配現用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設備準備

設備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差）。
實驗步驟如下：

試劑盒室溫平衡 28min，稀釋一步法酶標記抗體工作液，標記空白、標準、樣品孔。

各孔預先添加酶標記液 50μL，標準品孔加入梯度 MEPE 標準品 50μL，樣本孔加稀釋后待測液 50μL，空白孔補稀釋液。

封板 37℃孵育 60min，棄凈孔內液體，洗板 5 次，每次浸泡 30s，吸水紙徹底拍干。

每孔分別添加顯色液 A、B 各 50μL，輕微震蕩混勻。

避光 37℃顯色 14min，達到梯度色差后準備終止。

加入終止液 50μL，混勻終止顯色。

450nm 讀取吸光值，通過標準曲線計算 MEPE 含量。
公司正在出售的產品：