?產(chǎn)品名稱：萊氏無膽甾原體PCR檢測試劑盒
英文名稱：Acholeplasma laidlawii PCR
貨號：YS-P013772
分類：PCR檢測試劑盒
規(guī)格?：50T/盒
檢測原理：
選取萊氏無膽甾原體細胞膜合成相關(guān)特有基因為靶序列，試劑盒引物精準識別該原核生物核酸。
去除樣本中多糖、蛋白等 PCR 抑制物，以菌體 DNA 模板進行變性 - 退火 - 延伸循環(huán)擴增。
實時熒光監(jiān)測擴增過程，Ct 值在閾值范圍內(nèi)可判定樣本感染萊氏無膽甾原體。
實驗流程：
1. DNA提?。颖局苽鋮^(qū)）
使用自選方法或兼容試劑盒提取樣本DNA，建議濃度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。
2. 標準曲線制備（獨立操作區(qū)）
標記6管為梯度稀釋點（如7-2），每管加45 μL DEPC水。
取5 μL陽性對照依次稀釋，混勻后作為標準品（避免污染）。
3. PCR反應(yīng)體系配制（試劑配制區(qū)）
按以下比例配制（示例）：
| 組分 | 體積（μL） |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上機檢測
程序設(shè)置：預(yù)變性95℃ 3 min；40循環(huán)（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲線分析。
數(shù)據(jù)分析：根據(jù)Ct值及標準曲線計算樣本濃度。
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注意事項：
1、實驗分區(qū)管理?
實驗全程需嚴格劃分三個獨立區(qū)域：?試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR擴增區(qū)?，各區(qū)實驗服、移液器及耗材?嚴禁混用?，防止交叉污染。
?2、防止污染操作?
使用帶濾芯槍頭，每步更換槍頭；
陽性對照操作應(yīng)在專用生物安全柜中進行，避免污染其他試劑；
加樣后立即蓋緊管蓋，避免氣溶膠擴散。
?3、試劑保存與使用?
所有試劑需?-20℃避光保存?，避免反復(fù)凍融，確保穩(wěn)定性；
使用前于冰上解凍并輕柔混勻，瞬時離心后使用。
關(guān)鍵字： 萊氏無膽甾原體;PCR檢測試劑盒;
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