概述
本試劑提供了進(jìn)行簡便,靈敏和防污染的PCR檢測系統(tǒng)。核心試劑包含了化學(xué)修飾熱啟動酶 (Hotstart HiTaq DNA polymerase),UDG酶 (Uracil-DNA Glycosylase),MgCl2溶液,經(jīng)過優(yōu)化的緩沖液和優(yōu)化比例的dUTP/dNTP Mix。 UDG的作用原理：在PCR反應(yīng)前50°C,2 min反應(yīng)中,UDG酶可水解PCR反應(yīng)液中含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物的尿嘧啶堿基和糖磷酸骨架的N-糖苷鍵,釋放游離尿嘧啶。隨后進(jìn)行95°C,10 min熱處理,在UDG酶失活的同時進(jìn)一步對磷酸骨架水解,從而消除含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物的污染。UDG酶可以作用于單鏈或雙鏈DNA,對RNA無活性。
特點(diǎn)
只需加入適量的引物和探針或熒光染料,即可進(jìn)行熒光PCR檢測。在PCR反應(yīng)前加入UDG可降解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物,而對不含尿嘧啶的模板無任何影響,可選擇性水解含有尿嘧啶的PCR產(chǎn)物。在反應(yīng)中Hotstart HiTaq DNA polymerase的加入使得反應(yīng)具有極強(qiáng)的特異性和高度靈敏度。
應(yīng)用
熒光定量PCR
組份
Hotstart HiTaq Master PCR Mix,5X Hotstart HiTaq Reaction Buffer (Mg2+濃度2.5 mM)
包裝
100RXN,620
關(guān)鍵字： 化學(xué)修飾熱啟動酶防污染Mix
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