一、服務(wù)內(nèi)容
1.抗原準備；
2.免疫Balb/C小鼠；
3.小鼠抗血清檢測（WB/ELISA檢測內(nèi)源性蛋白）；
4.檢測結(jié)果合格進行細胞融合及細胞株的篩選、亞克隆、建立穩(wěn)定分泌抗體的細胞株；
5.細胞株分泌抗體重鏈（Fcγ）亞型鑒定；
6.抗體擴大生產(chǎn)、制備腹水以及Protein A/G純化。
二、抗原要求
1.蛋白抗原：蛋白總量>4mg、濃度＞1mg/ml、純度>85%、分子量>10KDa；
2.多肽抗原：多肽重量>4mg、純度>95%；
3.細菌等抗原：咨詢。
三、收費標準
步驟
時間
收費<span color:white;"="" style="box-sizing: border-box; font-size: 9pt;">
免疫
三次免疫后（效價達不到融合要求繼續(xù)免疫）測尾血效價
10周
免疫5只Balb/c小鼠，免疫量100ug/只,最終達到融合效價>1:10000
￥2000
融合
采用已優(yōu)化的條件進行高效融合
1天
取脾臟分離成單細胞與對數(shù)期的SP2/0按5：1混合，進行細胞融合，20%胎牛血清，HAT選擇培養(yǎng)基，鋪10塊板
￥8000
上清 檢測
融合7天后，ELISA檢測，用檢測抗原包被ELISA板，二抗anti-mouse HRP，TMB顯色
陰性（正常培養(yǎng)基）OD<0.1陽性O(shè)D>0.5視為陽性孔
￥6000
亞克隆
對陽性孔采用有限稀釋法進行亞克隆直到含有細胞的所有孔均為陽性
3周
ELISA檢測挑選OD值高的細胞孔，進行后續(xù)亞克隆直到含有細胞的所有孔均為陽性
￥10000
定株
陽性穩(wěn)定的孔進行擴大培養(yǎng)
1周
擴大培養(yǎng)上清，按客戶要求進行功能檢測（WB/ELISA/IHC），滿足客戶要求后，將應(yīng)客戶要求交付3株細胞（每株細胞2管）
腹水
指定細胞株生產(chǎn)10mL腹水
離心后10mL腹水
￥4000
亞型
應(yīng)客戶要求測定細胞株亞型
測定重鏈和輕鏈亞型
純化
ProteinA或G純化10mL腹水
根據(jù)亞型選擇ProteinA或G
四、客戶提供材料
1.蛋白抗原、多肽抗原、細菌等；
2.抗原信息及相關(guān)文獻（可選）。
五、提交給客戶結(jié)果
1.實驗報告；
2.細胞株、抗體。
六、服務(wù)說明
1.多肽合成需要另行收費；
2.抗血清檢測如果不能達到我們的要求（1:10000以上），不進行后續(xù)實驗服務(wù)；
3.特殊要求另行協(xié)商；
4.磷酸化、甲基化、乙?；忍厥庑揎梿慰沽硇袇f(xié)商。
5.最終提供10mg抗體，超過10mg，收費標準為100元/1mg.
北京索萊寶科技有限公司
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