"HUT102細胞系|人T淋巴瘤細胞 HS-C0366950 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HUT102細胞系|人T淋巴瘤細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。 L-02細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Calu-1細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:消化10分鐘。1:2。3-4天長滿 NCI-H522[H522]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H1648細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:1:3-1:6傳代 B104細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HPA-s細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 HUT102細胞系|人T淋巴瘤細胞 細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分 培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?!緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液,計數(shù),使細胞密度達5×10/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10%二甲基亞砜(DMSO)或甘油,可使冰點降低,使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做好標(biāo)記;6)凍存:在特殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當(dāng)掌握下降冷凍速度,過快能影響細胞內(nèi)水分透出,太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套,以免液氮凍傷。【復(fù)蘇細胞】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分,密度應(yīng)達到10/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10/ml數(shù)量。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 HFF細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:成纖維細胞;細胞傳代方法:1:5—1:7傳代 LCC細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H1436[H1436]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SK-GT-4細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 LCC細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MCFs細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HUT102細胞系|人T淋巴瘤細胞 MEG-01細胞系;細胞生長特性:懸浮生長;細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣;細胞傳代方法:1:2傳代。3天內(nèi)可長滿。 Mv.1.Lu(NBL-7)細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H1404[H1404]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 A2780細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣;細胞傳代方法:1:2傳代 HUP-T4細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2傳代 H3396細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HPaSteC(HPSC)細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 CATH.a細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 ST2細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SW527細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 BC3H1細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 293(HEK-293,HEK293)細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 U343細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NK-92MI[NK92MI]細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HBL-100細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:2傳代 NCI-H520細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:3-1:6傳代;2-3天換液1次 HumanHth細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:3傳代,2-3天換液一次 QGY-7701細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內(nèi)可長滿 HCEC-B4G12細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 PHM82細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 KMM1細胞系;細胞生長特性:懸?。患毎螒B(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 3T3TK細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SW837細胞系;細胞生長特性:懸浮生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:1:2—1:5傳代,每周換液1-2次 HDF-a細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Jurkat(clone E6-1)細胞系;細胞生長特性:懸??;細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SW1271細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MOLM-16細胞系;細胞生長特性:懸?。患毎螒B(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 FRTL-5細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NCI-H1563細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:3-1:4傳代;每周換液2次。 EFM-19細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Kasumi-6細胞系;細胞生長特性:懸浮生長;細胞形態(tài)特性:成髓細胞;細胞傳代方法:每周2-3次。 CMT-167細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:5傳代 Changliver細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣;細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。 HCC1954細胞系;細胞生長特性:偶爾上皮細胞空泡;細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣;細胞傳代方法:1:4-1:8傳代;每周換液2-3次。 NCI-H250細胞系;細胞生長特性:半貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 hfl-I細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:成纖維細胞樣;細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。 VERO C1008(E6)細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 TE-9細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。 RKN細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:1:2傳代 NCI-H226細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣;細胞傳代方法:1:2傳代 VMM39細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 CAOV-4細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 KYSE450細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 UACC-812細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:3傳代;5-7天1次。 HCC4006細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣;細胞傳代方法:1:4-1:6傳代,每周2-3次。 Pfeiffer細胞系;細胞生長特性:懸浮生長;細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣;細胞傳代方法:1:2傳代 RD細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:梭型和大的多核細胞;細胞傳代方法:1:2-1:4傳代,3-4天換液1次。 DoTc2-4510細胞系;細胞生長特性:貼壁生長 ;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:1:2—1:3傳代,每周換液2—3次 Hs 729細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:成纖維細胞;細胞傳代方法:1:2傳代;每周換液2-3次。 A1847細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Hela-cx40細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MDA-MB-231細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮樣;細胞傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內(nèi)可長滿 HPASMC細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 VCaP細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HPMC細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 F9細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HUT102細胞系|人T淋巴瘤細胞 PK136細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 SPC-A-1細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 ChaGo-K-1細胞系;細胞生長特性:貼壁生長;細胞形態(tài)特性:上皮細胞;細胞傳代方法:1:4-1:8傳代;每周換液2次。 6TCEM細胞系;細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MBMEC細胞系;細胞生長特性:貼壁;細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書;細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 "
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